Anti-Apolipoprotein D (APOD) Polyklonaler Antikörper für IHC-P und ELISA - P05090

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Apolipoprotein D

• Apolipoprotein D (APOD) ist ein 21 kDa sekretiertes Glykoprotein der Lipokalin-Familie, das erstmals im menschlichen Plasma in hochdichten Lipoproteinen (HDL) nachgewiesen wurde.
• APOD bildet einen makromolekularen Komplex mit Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase (LCAT) und ist wahrscheinlich an dem Transport und der Bindung von Bilin beteiligt.
• Das Protein kann eine Vielzahl hydrophober Liganden unter unterschiedlichen physiologischen Bedingungen transportieren, was auf eine Rolle bei Lipidmetabolismus und Neuroprotektion hindeutet.
• APOD wird überwiegend sekretiert und in zahlreichen Geweben exprimiert, darunter Leber, Darm, Bauchspeicheldrüse, Niere, Plazenta, Nebennieren, Milz, fetales Gehirn und Tränen.
• Strukturell enthält APOD konservierte Disulfidbindungen und eine Pyrrolidoncarbonsäure-Modifikation, die zu seiner Stabilität und Funktion beitragen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Glykosylierung; das reife Protein verfügt über kein Signalpeptid mehr, das berechnete Molekulargewicht beträgt etwa 21 kDa.
• Als Mitglied des Referenzproteoms wurde APOD umfassend durch 3D-Strukturbestimmung und direkte Proteinsequenzierung charakterisiert, was die Biomarker- und Diagnostikforschung erleichtert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 21–189 des reifen humanen APOD und deckt den Großteil der Ligandenbindungsdomäne ab; dieses Design begünstigt möglicherweise den Nachweis sowohl nativer als auch partiell denaturierter Konformationen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) sollten Sie Antigen-Retrieval-Protokolle in Betracht ziehen, die für sezernierte Proteine geeignet sind; ein milder Citratpuffer (pH 6,0) und moderate Erwärmung können die Epitopfreilegung in Paraffineinbettungen verbessern.
• Bei ELISA-Anwendungen kann die Kombination dieses polyklonalen Antikörpers mit einem monokonalen Fangantikörper die Assayspezifität verbessern; optimieren Sie Beschichtungs- und Blockierungsbedingungen unter Verwendung des rekombinanten Proteins als Referenzstandard.
• Aufgrund der sezernierten Natur von APOD sollte die Probenvorbereitung aus Gewebelysaten oder biologischen Flüssigkeiten geeignete Proteaseinhibitoren umfassen, um die Proteinintegrität zu erhalten.
• Validieren Sie die Färbespezifität durch den Vergleich der Signalintensitäten zwischen Geweben mit bekanntermaßen hoher (z. B. Leber, Plazenta) und niedriger APOD-Expression und führen Sie eine Negativkontrolle mit präimmuner Kaninchen-IgG durch.

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