Monoklonaler Anti-Apolipoprotein-B-(ApoB)-Antikörper für WB und ELISA – P04114

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Apolipoprotein B

• ApoB liegt in zwei Hauptisoformen vor: ApoB-100 (vollständig, 516 kDa) und ApoB-48 (verkürzt, 48 % des N-Terminus), das durch RNA-Editierung im Darm gebildet wird.
• ApoB-100 ist ein wesentlicher Proteinbestandteil von Very-Low-Density-Lipoproteinen (VLDL) und Low-Density-Lipoproteinen (LDL), während ApoB-48 in Chylomikronen vorkommt.
• ApoB-100 dient als Ligand für den LDL-Rezeptor (ApoB/E-Rezeptor) und vermittelt die zelluläre Aufnahme und Clearance von LDL-Cholesterin.
• Auf subzellulärer Ebene befindet sich ApoB im Zytoplasma, wird in den Blutkreislauf sezerniert und ist während des Aufbaus von Lipoproteinen mit Lipidtröpfchen assoziiert.
• Das Protein durchläuft umfangreiche posttranslationale Modifikationen, darunter Acetylierung, Phosphorylierung, Palmitoylierung und Glykosylierung, und enthält wichtige Disulfidbrücken.
• Genetische Varianten in APOB stehen mit Atherosklerose, familiärer Hypercholesterinämie und anderen Fettstoffwechselstörungen in Zusammenhang.
• Schlüsselbegriffe, die seine biologische Rolle widerspiegeln, sind Cholesterinstoffwechsel, Lipidtransport, Heparinbindung und Krankheitsbeteiligung.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen (Reste 50–150) ist sowohl in ApoB-100 als auch in ApoB-48 vorhanden; daher kann der Antikörper in geeigneten Proben beide Isoformen nachweisen.
• Verwenden Sie für den Western Blot Polyacrylamidgele mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 4–6 %) und verlängerte Transferzeiten, um das hohe Molekulargewicht (516 kDa) von ApoB-100 zu berücksichtigen.
• Validieren Sie die Spezifität mit geeigneten Positivkontrollen (z. B. humane Leber oder Plasma) und Negativkontrollen und bestätigen Sie die angegebene Kreuzreaktivität mit Rattenproben.
• Optimieren Sie bei ELISA-Anwendungen die Antikörperkonzentration für die Funktion als Fang- oder Detektionsantikörper unter Verwendung von rekombinantem ApoB oder gereinigtem LDL als Antigen.

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