Anti-APOB-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA – P04114

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ApoB

• Apolipoprotein B (ApoB) liegt in zwei Hauptisoformen vor: ApoB-48, das im Darm synthetisiert und in Chylomikronen eingebaut wird, sowie ApoB-100, das in der Leber produziert wird und in VLDL- und LDL-Partikeln vorkommt.
• Die ApoB-mRNA durchläuft eine gewebespezifische RNA-Editierung, durch die ein vorzeitiges Stoppcodon eingeführt wird, wodurch im Darm die verkürzte ApoB-48-Isoform entsteht.
• ApoB-100 fungiert als Ligand für den LDL-Rezeptor (apoB/E-Rezeptor) und vermittelt die zelluläre Bindung und Internalisierung von LDL-Partikeln.
• ApoB spielt eine zentrale Rolle im Lipidstoffwechsel und -transport und ist an der Cholesterinhomöostase sowie am Aufbau von Lipoproteinen beteiligt.
• Auf subzellulärer Ebene befindet sich ApoB im Zytoplasma, wird in das Plasma sezerniert und ist mit Lipidtröpfchen assoziiert.
• Das Protein durchläuft mehrere posttranslationale Modifikationen, darunter Phosphorylierung, Acetylierung, Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Palmitoylierung.
• Mutationen in APOB stehen im Zusammenhang mit familiärer Hypercholesterinämie, Atherosklerose und anderen Lipidstörungen.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 1890–2190 des humanen ApoB-100 (NP_000375.3); diese Region fehlt in der kürzeren ApoB-48-Isoform, wodurch der Antikörper spezifisch für ApoB-100 ist, sofern nicht anders angegeben.
• Aufgrund seines hohen Molekulargewichts (~516 kDa) sollten für den Western Blot SDS-PAGE-Gele mit niedrigem Acrylamidanteil (z. B. 6–8 %), verlängerte Transferzeiten und ein Marker für hohe Molekulargewichte verwendet werden.
• Es sollte eine Validierung des Antikörpers im relevanten Probensystem in Betracht gezogen werden (z. B. Leberlysate für ApoB-100, Darmlysate für ApoB-48), um den Nachweis der Isoformen zu bestätigen.
• Für IHC-P und IF/ICC sollten die Protokolle zur Antigenrückgewinnung (z. B. hitzeinduzierte Epitopdemaskierung) sowie die Fixierungsbedingungen für die jeweiligen Gewebetypen optimiert werden.
• Bei ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Fang- oder Nachweisreagenz verwendet werden; eine empirische Optimierung von Beschichtungspuffer, Blockierung und Nachweisbedingungen wird empfohlen.

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