Anti-APOA1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P02647

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Apolipoprotein A-I

• Apolipoprotein A-I (ApoA-I) ist die Hauptproteinkomponente von High-Density-Lipoprotein (HDL) im Plasma und kommt auch in Chylomikronen vor; es spielt eine zentrale Rolle in der Cholesterinhomöostase.
• Es vermittelt den reversen Cholesterintransport, indem es den Cholesterin-Efflux aus peripheren Geweben fördert und als essenzieller Kofaktor für Lecithin-Cholesterin-Acyltransferase (LCAT) wirkt, die Cholesterin für die Verpackung in HDL-Partikel verestert.
• ApoA-I ist ein sezerniertes Protein, das hauptsächlich in Leber und Dünndarm synthetisiert und dann in den Kreislauf abgegeben wird, wo es sich mit Lipidpartikeln assoziiert.
• Das Gen APOA1 gehört zum Apolipoprotein-A1/C3/A4/A5-Gencluster auf Chromosom 11 und kodiert für ein Präproprotein, das durch proteolytische Prozessierung in das reife 243-Aminosäure-Protein überführt wird.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Oxidation an Met-110 und Met-136, die bei Personen mit Risikofaktoren für koronare Herzkrankheit wie Rauchen und eNOS-Genvarianten erhöht sind; das Protein kann auch glykiert, nitriert und palmitoyliert werden.
• ApoA-I ist an Amyloidose beteiligt, bei der bestimmte Varianten Amyloidfibrillen bilden, sowie an Atherosklerose, bei der oxidierte Formen in Aortenläsionen angereichert sind und mit der Krankheitsschwere korrelieren.
• Als Teil des SPAP-Komplexes aktiviert ApoA-I die Motilität von Spermatozoen, was auf eine extrahepatische Funktion über den Lipidtransport hinaus hinweist.
• Die Bedeutung des Proteins im Lipidstoffwechsel wird durch seine Assoziation mit HDL-Spiegeln und kardiovaskulären Erkrankungen unterstrichen, was es zu einem wichtigen Biomarker und therapeutischen Ziel macht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 25–267, was der reifen, sezernierten Form von humanem ApoA-I entspricht; erwägen Sie, die Reaktivität gegen endogenes Protein in relevanten biologischen Proben (z. B. Serum, Plasma oder Leberlysaten) zu überprüfen.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~28 kDa; eine Bande in dieser Größe in humanen, Maus- und Rattenproben bestätigt die Kreuzreaktivität. Optimieren Sie die Probenvorbereitung, um Lipidinterferenzen bei Verwendung von Plasma oder Serum zu reduzieren.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) testen Sie den Antikörper an paraffineingebetteten Leber- oder atherosklerotischen Arteriengewebeschnitten unter Verwendung einer geeigneten Antigen-Demaskierung, da ApoA-I extrazellulär ist und möglicherweise milde Demaskierungsbedingungen erfordert.
• Für ELISA validieren Sie das Antikörperpaar in einem Sandwich-Format, wenn es als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet wird; die polyklonale Natur kann eine Signalverstärkung bieten, erfordert jedoch eine sorgfältige Titration.
• Bei der Arbeit mit oxidierten Formen von ApoA-I beachten Sie, dass Methioninoxidation die Epitoperkennung verändern kann; Reduktionsmittel und frische Proben werden empfohlen.

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