Anti-APLF Kaninchen-polyklonale Antikörper für WB, ELISA - Q8IW19

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von APLF

• APLF wirkt als Histon-Chaperon, das für die Reparatur von Einzel- und Doppelstrangbrüchen der DNA essenziell ist.
  Verwandte Referenzen: PMID:17353262, PMID:17396150, PMID:21211721
• Es wird durch Bindung an verzweigte Poly-ADP-Ribose-Ketten an DNA-Schadensstellen rekrutiert, wo es die Histonverdrängung und die Rekrutierung der Histonvariante MACROH2A1 fördert.
  Verwandte Referenzen: PMID:21211722, PMID:29905837, PMID:30104678
• APLF besitzt Apurinic-Apyrimidinic (AP)-Endonuklease- und 3'-5'-Exonuklease-Aktivitäten und kann in vitro Schnitte an Hydroxyuracil und anderen Pyrimidinbasenschäden einführen.
  Verwandte Referenzen: PMID:17353262, PMID:17396150
• Im Nicht-homologen Endverbindungsweg (NHEJ) arbeitet APLF mit PARP3 zusammen, um den LIG4-XRCC4-Komplex auf Chromatin zu halten und beschleunigt so die DNA-Ligation.
  Verwandte Referenzen: PMID:21211721, PMID:23689425
• APLF reguliert die Zellpluripotenz negativ durch Förderung des Histonaustauschs und ist für die Embryoimplantation während der epithelial-mesenchymalen Transition bei Weibchen erforderlich.
• Subzellulär lokalisiert APLF im Zellkern, auf Chromosomen und im Zytoplasma/Zytosol, was mit seinen Funktionen bei der DNA-Reparatur und Chromatinregulation übereinstimmt.
• Strukturelle Motive umfassen eine FHA-Domäne, Zinkfinger-Wiederholungen sowie Stellen für Phosphorylierung und ADP-Ribosylierung, was seine Rolle bei signalabhängigen DNA-Schadensantworten unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für Western Blot erwarten Sie eine Bande nahe 57 kDa in menschlichen Proben; fügen Sie eine Positivkontrolle wie das rekombinante Immunogen (AS 200-380) hinzu, um die Detektion zu bestätigen.
• Da eine Kreuzreaktivität mit Ratte beobachtet wurde, validieren Sie den Antikörper in Rattenzell- oder Gewebslysaten, wenn Ihre Forschung Nagetiermodelle umfasst.
• Für ELISA-Anwendungen kann die Beschichtung mit dem rekombinanten APLF-Fragment die Signalspezifität verbessern; Assay-Bedingungen sollten empirisch optimiert werden.
• Aufgrund der nuklearen und zytoplasmatischen Lokalisation von APLF sollten Sie eine subzelluläre Fraktionierung in Betracht ziehen, um das Ziel anzureichern und eine empfindlichere Detektion im WB zu ermöglichen.
• Da APLF an der DNA-Schadensreparatur beteiligt ist, kann die Behandlung mit DNA-schädigenden Agenzien die Proteinrekrutierung an Chromatin erhöhen; Zeitverlaufsexperimente können dynamische Lokalisationsänderungen aufzeigen.

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