Anti-APEX1/APE1 Kaninchen-Polyclonalantikörper (KO-validiert) für WB, IF/ICC, IP, ELISA – P27695

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von APEX1/APE1

• APEX1, auch bekannt als APE1, REF1, HAP1, APEX-Nuklease (APEN), ist ein multifunktionales Protein mit zwei Hauptaktivitäten: DNA-Reparatur und Redoxregulation von Transkriptionsfaktoren und spielt eine zentrale Rolle in der zellulären Antwort auf oxidativen Stress. Verwandte Referenzen: PMID:11118054 PMID:11452037 PMID:15831793
• Als apurinische/apyrimidinische (AP) Endodesoxyribonuklease initiiert APEX1 den Basen-Exzisions-Reparaturweg (BER), indem es die hydrolytische Spaltung des DNA-Rückgrats an AP-Stellen katalysiert, und besitzt außerdem 3'-5'-Exodesoxyribonuklease- und DNA-3'-Phosphodiesterase-Aktivitäten zur Verarbeitung blockierter DNA-Enden. Verwandte Referenzen: PMID:15380100 PMID:16617147 PMID:18439621 PMID:11832948 PMID:1719477 PMID:15831793 PMID:7516064
• Durch seine Redoxfunktion reguliert APEX1 die DNA-Bindung und transkriptionelle Aktivität von Transkriptionsfaktoren, einschließlich des FOS/JUN AP-1-Komplexes, durch Kontrolle des Redoxstatus ihrer DNA-Bindungsdomänen. Verwandte Referenzen: PMID:10023679 PMID:11118054 PMID:11452037
• APEX1 lokalisiert sich in mehreren subzellulären Kompartimenten, darunter dem Zellkern (Nukleolus und nukleäre Speckles), Zytoplasma, Mitochondrien und Endoplasmatisches Retikulum, was seine vielfältigen Funktionen widerspiegelt.
• APEX1 ist an der Rekombination des Immunglobulin-Isotyp-Klassenwechsels beteiligt, indem es AP-Stellen verarbeitet, die von AICDA und UNG erzeugt werden, und versetzte Nickstellen erzeugt, die durch nicht-homologe Endverbindung zu Doppelstrangbrüchen aufgelöst werden.
• Es fungiert außerdem als Endoribonuklease, reguliert den Stoffwechsel einzelsträngiger RNA durch Vermittlung des MYC-mRNA-Umsatzes und beteiligt sich an der rRNA-Qualitätskontrolle während des Zellzyklusverlaufs. Verwandte Referenzen: PMID:19188445 PMID:19401441 PMID:21762700
• Posttranslationale Modifikationen wie Acetylierung, Phosphorylierung, S-Nitrosylierung und Ubiquitinierung modulieren die enzymatischen und Signalaktivitäten von APEX1.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Für den Western Blot ist eine Bande bei ca. 36 kDa zu erwarten; die KO-Validierungsdaten bestätigen die Zielspezifität, dennoch sollten Nutzer die Leistung in ihrem eigenen Experimentalsystem überprüfen.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC zeigt APEX1 eine überwiegende nukleäre Lokalisierung mit möglicher zytoplasmatischer/mitochondrialer Färbung; optimieren Sie Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle, um die Epitopzugänglichkeit zu erhalten.
• Der Antikörper wurde für die Verwendung in Immunpräzipitation und ELISA beschrieben; für diese Anwendungen wird eine individuelle Optimierung der Antikörperverdünnung und Inkubationsbedingungen empfohlen.
• Aufgrund der polyklonalen Natur und der Immunisierung mit vollständigem rekombinantem Protein (AA 1-318) weist der Antikörper wahrscheinlich mehrere Epitopspezifitäten auf, was eine robuste Detektion in verschiedenen Assayformaten und bei posttranslationalen Modifikationen ermöglichen kann.

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