Anti-APC polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P25054

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: APC-Funktion und -Lokalisierung

• APC (Adenomatöse Polyposis coli-Protein) ist ein 312 kDa Tumorsuppressor, der als negativer Regulator des Wnt-Signalwegs fungiert, indem es den schnellen Abbau von CTNNB1 (β-Catenin) fördert.
• Es spielt eine Rolle bei der Zellmigration, wird durch hepatocyte growth factor (HGF) aktiviert und ist für die MMP9-Hochregulierung über den JNK-Signalweg in kolorektalen Tumorzellen erforderlich.
• APC assoziiert sowohl mit Mikrotubuli als auch mit Aktinfilamenten, vermittelt die Organisation von F-Aktin in geordnete Bündel und stabilisiert Mikrotubuli, insbesondere an der Zellkortex, durch Interaktionen mit ERBB2, Rho GTPasen und DIAPH1. Verwandte Referenzen: PMID:17293347
• Das Protein lokalisiert an Adhärenzverbindungen, Zytoplasma, Zytoskelett, Lamellipodien, Riffelmembranen und der Zellmembran, was seine dynamischen Rollen bei Zelladhäsion und -motilität widerspiegelt.
• Es existieren mehrere alternative Isoformen; Isoform 1A wird im Gehirn sehr stark exprimiert, während Isoform 1B die vorherrschende Form in den meisten anderen Geweben ist, einschließlich des Gastrointestinaltrakts und des Blutes.
• APC enthält mehrere funktionelle Domänen und Motive, einschließlich Coiled-Coil-Regionen, Armadillo-Repeats und β-Catenin-Bindestellen, und unterliegt Phosphorylierung, Acetylierung und Ubiquitinierung, die seine tumorsuppressiven Aktivitäten modulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 2600–2760 von humanem APC umfasst, lokalisiert in der C‑terminalen Region. Dieses Design kann zur Erkennung mehrerer Isoformen und Spezies beitragen.
• Für Western Blotting beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 312 kDa; ziehen Sie die Verwendung eines Gels mit niedrigem Prozentgehalt (z. B. 6–8%) SDS‑PAGE und verlängerte Transferzeiten für eine optimale Auflösung in Betracht.
• Bei der Immunhistochemie (IHC‑P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC) sollte die Signalspezifität unter Verwendung geeigneter positiver und negativer Kontrollgewebe oder -zellen, die APC exprimieren, bestätigt werden.
• ELISA kann zum Nachweis eingesetzt werden; die optimale Antikörperverdünnung und Blockierbedingungen müssen für jedes Assay-Format empirisch bestimmt werden.
• Kreuzreaktivität mit humanem, murinem und ratten APC wird berichtet; bei der Arbeit mit anderen Spezies sollte die Reaktivität im relevanten Proben-System validiert werden.

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