Anti-AP2S1-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB und ELISA – P53680

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von AP2S1

• AP2S1 kodiert die Sigma-Untereinheit des Adapterprotein-Komplexes 2 (AP-2), eines heterotetrameren Komplexes, der für die clathrinvermittelte Endozytose an der Plasmamembran essenziell ist. Es ist auch als AP17, CLAPS2, Sigma2-Adaptin und clathrinbeschichtungsassoziiertes Protein AP17 bekannt.
• Als Kernkomponente von AP-2 trägt die Sigma-Untereinheit durch die Erkennung der Endozytosesignale Y-X-X-Φ und [ED]-X-X-X-L-[LI] innerhalb der zytosolischen Schwänze von Frachtproteinen zur selektiven Rekrutierung transmembranärer Fracht in clathrinbeschichtete Vesikel (CCVs) bei.
• AP-2 fungiert als wichtiger Clathrin-Adapter, der das Clathrin-Gitter und Membrankomponenten miteinander verbindet, um die Vesikelbildung und Frachtsortierung voranzutreiben. Darüber hinaus ist es an der Rückgewinnung synaptischer Vesikelmembranen von der präsynaptischen Oberfläche beteiligt.
• Unter den vier Untereinheiten (α, β2, μ2, σ2) spielt die Sigma-Untereinheit eine Rolle bei der Stabilisierung des Komplexes und ist an der Erkennung von Sortiermotiven auf Basis von Dilysin beteiligt.
• Auf subzellulärer Ebene lokalisiert sich AP2S1 an der Zellmembran und in beschichteten Gruben, was mit seiner Rolle bei frühen endozytotischen Ereignissen übereinstimmt.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehört die Phosphorylierung (wie durch das UniProt-Schlüsselwort angegeben), und alternatives Spleißen erzeugt verschiedene Isoformen.
• AP2S1 kann zusätzlich zur Aufrechterhaltung der extrazellulären Kalziumhomöostase beitragen, obwohl diese Funktion bislang weniger gut charakterisiert ist.

Experimentelle Hinweise und technische Tipps

• Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen war ein synthetisches Peptid, das der N-terminalen Region (Aminosäuren 1–100) des humanen AP2S1 entspricht. Diese Region ist wahrscheinlich oberflächenexponiert und kann eine gute Zugänglichkeit des Epitops bieten. Ziehen Sie gegebenenfalls Peptidblockierungsexperimente in Betracht, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 17 kDa. Achten Sie auf einen geeigneten Gelanteil (z. B. 12–15 %) und geeignete Transferbedingungen für Proteine mit niedrigem Molekulargewicht. Validieren Sie den Antikörper in Ihrer spezifischen Probenmatrix, da posttranslationale Modifikationen oder Isoformvarianten das Bandenmuster beeinflussen können.
• Der Antikörper zeigt eine Kreuzreaktivität mit Maus und eignet sich daher für Studien an Mausmodellen oder in Mauszelllinien. Für ELISA sollte die Verwendung eines direkten oder indirekten Formats mit geeigneter Antigenbeschichtung in Betracht gezogen werden. Für jeden Assay werden Titration und Optimierung empfohlen.
• Aufgrund der Rolle von AP-2 bei der Endozytose kann dieser Antikörper zur Untersuchung des Frachttransports, der Rezeptorinternalisierung und der Dynamik synaptischer Vesikel nützlich sein. Kombinieren Sie ihn mit Organellenmarkern oder Funktionstests, um Lokalisation und Aktivität in den entsprechenden Kontext zu setzen.

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