Monoklonaler Antikörper gegen AP2A2/Alpha2-Adaptin für WB, ELISA - O94973

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Alpha2-Adaptin/AP2A2 Funktion und Lokalisierung

• Das AP2A2-Gen kodiert Alpha-Adaptin C, die Alpha-2-Untereinheit des heterotetrameren Adaptor-Protein-Komplexes 2 (AP-2), der für die Clathrin-vermittelte Endozytose essentiell ist.
• AP-2 fungiert als ein Haupt-Clathrin-Adaptor, der das Clathrin-Gitter sowohl mit Cargo-Proteinen als auch mit Phosphatidylinositol-Lipiden an der Plasmamembran verbindet und so die Bildung von Clathrin-beschichteten Vesikeln vorantreibt.
• Der Komplex erkennt selektiv Y-X-X-Φ- und [ED]-X-X-X-L-[LI]-Endozytose-Signal-Motive in den cytosolischen Schwänzen von Transmembran-Cargos, was eine effiziente Sortierung von Membranproteinen für die Internalisierung ermöglicht.
• Während der Langzeitpotenzierung in Hippocampus-Neuronen vermittelt AP-2 die Endozytose von ADAM10, ein entscheidender Schritt für die synaptische Plastizität. Verwandte Referenzen: PMID:23676497
• Die Alpha-2-Untereinheit bindet Polyphosphoinositid-haltige Lipide, um AP-2 an der Membran zu positionieren, während ihre C-terminale Appendage-Domäne als Gerüstplattform für endozytotische Zusatzproteine dient.
• AP2A2 wird auf Proteinebene im Gehirn exprimiert, was seine Bedeutung im neuronalen Membrantransport unterstreicht.
• Die subzelluläre Lokalisierung erfolgt überwiegend an der Zellmembran und in Coated Pits, was mit seiner Rolle in frühen endozytotischen Ereignissen übereinstimmt.
• Mit AP2A2 assoziierte Schlüsselwörter sind Alternatives Spleißen, Coated Pit, Endozytose, Lipidbindung, Membran und Proteintransport.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Reste 590–939 von humanem AP2A2, eine C-terminale Region, die die funktionell kritische Appendage-Domäne einschließt. Diese Region ist zwischen Mensch und Maus hochkonserviert, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blotting sollten reduzierende und denaturierende Bedingungen in Betracht gezogen werden. Das vorhergesagte Molekulargewicht beträgt 104 kDa; posttranslationale Modifikationen oder Spleißvarianten können jedoch zu leichten Bandenverschiebungen führen. Validieren Sie Ladekontrollen und optimieren Sie Blockierbedingungen.
• In ELISA-Anwendungen kann der Antikörper entweder zum Einfangen oder zum Nachweis verwendet werden. Testen Sie vorab serielle Verdünnungen des Antikörpers und Antigen-Beschichtungskonzentrationen, um das optimale Signal-Rausch-Verhältnis zu bestimmen.
• Bei der Analyse von Mausproben ist zu beachten, dass, obwohl die Epitop-Region konserviert ist, die spezies-spezifische Reaktivität in Ihrem Assaysystem immer bestätigt werden sollte, da die Antikörperleistung je nach Probenvorbereitung und Nachweisprotokollen variieren kann.

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