Anti-ANPEP/CD13-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA – P97449

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Aminopeptidase N (CD13)

• Aminopeptidase N (APN/CD13) ist eine membrangebundene Zinkmetalloprotease mit breiter Spezifität, die an der abschließenden Verdauung von Peptiden sowie an der Verarbeitung von Peptidhormonen, Neuropeptiden und Chemokinen beteiligt ist (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• Sie spaltet Peptide, die an Moleküle des Haupthistokompatibilitätskomplexes der Klasse II auf antigenpräsentierenden Zellen gebunden sind, was auf eine Rolle bei der Antigenpräsentation hindeutet. Zugehörige Referenzen: PMID:8691132
• APN kann außerdem an der Angiogenese beteiligt sein und die Cholesterinkristallisation fördern (aufgrund von Ähnlichkeiten).
• Sie fungiert als Bindungspartner des Aminosäuretransporters SLC6A19 und reguliert dessen Aktivität, wodurch sie zum Aminosäuretransport beiträgt. Zugehörige Referenzen: PMID:22677001
• Das Protein ist in der Zellmembran lokalisiert und wird stark im intestinalen Bürstensaum, in Niere und Leber sowie auf Immunzellen einschließlich Monozyten, Makrophagen, dendritischen Zellen und B-Zellen (jedoch nicht auf T-Zellen) exprimiert. Zugehörige Referenzen: PMID:22677001, PMID:8103749, PMID:8805662
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören N-Glykosylierung, Phosphorylierung, Disulfidbrückenbildung und Tyrosinsulfatierung.
• Es enthält ein für die M1-Familie der Metalloproteasen typisches Zinkbindungsmotiv und ist über eine N-terminale Signalankersequenz an der Membran verankert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (AS 69–966) deckt den Großteil der extrazellulären Domäne ab. Stellen Sie bei der Verwendung epitopspezifischer Reagenzien sicher, dass Ihr Nachweissystem diese Region erkennt.
• Beim Western Blot wird eine Bande bei etwa 109 kDa erwartet. Verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und Beladungskontrollen.
• Bei Immunfluoreszenz (IF-P) und Immunhistochemie (IHC-P) sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle für Membranproteine optimiert werden. Für Paraffin-eingebettete Gewebe kann eine Antigen-Retrieval-Behandlung erforderlich sein.
• Eine Kreuzreaktivität mit humanem und Ratten-CD13 wurde berichtet. Validieren Sie den Antikörper vor einer quantitativen Analyse in der relevanten Spezies und dem relevanten Gewebe.
• Für ELISA sollte bei der Entwicklung eines Sandwich-Assays die Kombination mit einem Detektionsantikörper in Betracht gezogen werden, der ein nicht überlappendes Epitop erkennt.

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