Anti-ANO1 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q5XXA6

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ANO1-Funktion und Lokalisation

• ANO1 (Anoctamin-1) ist ein Mitglied der Anoctamin-Familie, auch bezeichnet als DOG1, TMEM16A, ORAOV2 oder TAOS2. Es handelt sich um ein 114 kDa großes Multipass-Transmembranprotein mit einer konservierten Calcium-Bindungsdomäne und vorhergesagten N-Glykosylierungsstellen.
• ANO1 fungiert als ein calciumaktivierter Chloridkanal (CaCC), der die Anionensekretion über Epithelien vermittelt und zur glatten Muskelkontraktion sowie zur Schrittmacheraktivität in gastrointestinalen interstitiellen Cajal-Zellen beiträgt. Verwandte Referenzen: PMID:20056604, PMID:22178883, PMID:22946059
• Es wird für die CFTR-Aktivierung benötigt, indem es die Freisetzung von Calcium aus dem endoplasmatischen Retikulum verstärkt und die CFTR-Membranexpression unterstützt. Verwandte Referenzen: PMID:28963502
• ANO1 trägt zur basalen und ATP-abhängigen Schleimsekretion in Atemwegen und Darm bei, und seine Aktivität wurde mit einer durch Interleukin und CLCA1 induzierten MUC5AC-Mucin-Expression in Verbindung gebracht, obwohl die Befunde widersprüchlich sind. Verwandte Referenzen: PMID:33026825, PMID:31732694
• Das Protein lokalisiert in relevanten Geweben an der apikalen Zellmembran und in präsynaptischen Kompartimenten.
• ANO1 wird breit exprimiert, mit höheren Spiegeln in Leber, Skelettmuskulatur und gastrointestinalen Muskeln; es wird auch in Nasenepithelien, Sammelrohren der Niere und ekkrinen Schweißdrüsen nachgewiesen. Verwandte Referenzen: PMID:32487539, PMID:24913262, PMID:15215166, PMID:16906560, PMID:25220078
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung, Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung; alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Reste 400–500 von humanem ANO1, eine intrazelluläre Region zwischen Transmembrandomänen. Dieses Design kann die Erkennung von nativen und denaturierten Formen ermöglichen und unterstützt so WB- und ELISA-Anwendungen.
• Für die Immunfluoreszenz/ICC sollten Permeabilisierungsschritte in Betracht gezogen werden, um dem Antikörper Zugang zum intrazellulären Epitop zu ermöglichen.
• Beim Western Blotting ist das vorhergesagte Molekulargewicht von ~114 kDa zu beachten; validieren Sie die Bandspezifität unter Verwendung geeigneter positiver und negativer Lysate (z. B. humane und murine gastrointestinale oder Atemwegsepithelzellen).
• Kreuzreaktivität mit Maus ist angegeben; überprüfen Sie dies in Ihrem spezifischen Modellsystem, da murines ANO1 eine hohe Sequenzidentität in der Immunogenregion aufweist.
• Optimale Arbeitsverdünnungen müssen experimentell für jede Anwendung bestimmt werden.

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