Anti-ANGPT1 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA – Q15389

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Angiopoietin-1

• Angiopoietin-1 (ANGPT1) ist ein sezerniertes Glykoprotein, das als Ligand für die Rezeptor-Tyrosinkinase TEK/TIE2 wirkt und eine zentrale Rolle bei der vaskulären Entwicklung und Erhaltung spielt.
• Nach der Bindung induziert ANGPT1 die Dimerisierung und Tyrosinphosphorylierung von TEK und aktiviert nachgeschaltete Signalkaskaden, die das Überleben, die Proliferation, Migration und Adhäsion von Endothelzellen sowie die Reorganisation des Aktin-Zytoskeletts regulieren.
• Während der Embryogenese ist ANGPT1 unerlässlich für die normale Angiogenese und Herzentwicklung und wirkt später und deutlich getrennt von VEGF-vermittelten Signalwegen.
• In ruhenden, konfluenten Endothelzellen rekrutieren ANGPT1-Oligomere TEK zu Zell-Zell-Kontakten und aktivieren bevorzugt den PI3K-AKT-Signalweg, um die vaskuläre Stabilität zu fördern und die Angiogenese zu hemmen.
• In wandernden Endothelzellen ohne Zell-Zell-Kontakte verankert ANGPT1 TEK an der extrazellulären Matrix und stimuliert die Signalgebung der Fokale Adhäsionskinase (FAK) und von MAPK/ERK, um die sprossende Angiogenese anzutreiben.
• ANGPT1 vermittelt die Reifung und Stabilisierung von Blutgefäßen und wird an den wechselseitigen Interaktionen zwischen Endothel und umgebendem Mesenchym beteiligt.
• Das Protein unterliegt einem alternativen Spleißen; die kanonische Isoform enthält ein Signalpeptid, coiled-coil-Domänen und eine C-terminale fibrinogenähnliche Domäne. Es entstehen Disulfidbindungen und es wird glykosyliert.
• ANGPT1 ist mit Krankheitsvarianten (z. B. HAE5) assoziiert, Mitglied des Referenzproteoms und wird in den extrazellulären Raum sezerniert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 277–498 von humanem ANGPT1, die die fibrinogenähnliche Domäne überspannt. Diese Region ist bei Maus und Ratte konserviert, was mit der berichteten Kreuzreaktivität des Antikörpers übereinstimmt. Für das Western Blotting ist unter reduzierenden Bedingungen eine Bande bei etwa 58 kDa zu erwarten; Lysate aus endothelreichen Geweben (z. B. Lunge, Plazenta) können als Positivkontrolle dienen.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) kann eine Antigenreaktivierung (z. B. hitzeinduzierte Epitopreaktivierung in Citratpuffer) die Färbung verbessern. Die endogene ANGPT1-Expression ist oft niedrig; erwägen Sie eine Signalverstärkung mit empfindlichen Nachweissystemen.
• Im ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Nachweisreagenz verwendet werden; die Paarung mit einem validierten monoklonalen Antikörper kann die Spezifität erhöhen. Validieren Sie die Assaybedingungen in der relevanten Probenmatrix.
• Der Antikörper erkennt sowohl endogenes als auch rekombinantes ANGPT1. Wenn Sie rekombinantes Protein als Standard verwenden, stellen Sie sicher, dass es die Immunogensequenz abdeckt, um die Antikörperreaktivität zu überprüfen.

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