Anti-AMT polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P48728

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AMT-Funktion und -Lokalisierung

• AMT kodiert für die Aminomethyltransferase, das T-Protein des mitochondrialen Glycin-Spaltungssystems (GCS), auch als Glycin-Decarboxylase-Komplex bezeichnet.
• Das GCS katalysiert die oxidative Decarboxylierung von Glycin zu Kohlendioxid, Ammoniak und einer Einkohlenstoffeinheit und verknüpft so den Glycinkatabolismus mit dem Folat-vermittelten Einkohlenstoffstoffwechsel und der Nukleotidsynthese.
• AMT ist ein Pyridoxalphosphat (PLP)-abhängiges Enzym, das die Methylamin-Einheit vom H-Protein-Intermediat auf Tetrahydrofolat überträgt und dabei 5,10-Methylentetrahydrofolat und Ammoniak bildet.
• In der mitochondrialen Matrix lokalisiert, unterstützt AMT den primären Glycin-Abbauweg und liefert Einkohlenstoffeinheiten für cytosolische Prozesse.
• Alternatives Spleißen führt zu mehreren Transkriptvarianten; pathogene Varianten in AMT sind mit der nicht-ketotischen Hyperglyzinämie (Glycin-Enzephalopathie) assoziiert, einer schweren autosomal-rezessiven neurometabolischen Störung.
• Das Protein weist ein mitochondriales Transitpeptid auf und ist mit Schlüsselwörtern wie Aminotransferase, Krankheitsvariante und Referenzproteom annotiert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Die Immunogenregion (Reste 107–386) liegt innerhalb des reifen Proteins und könnte die Detektion mehrerer Isoformen ermöglichen; validieren Sie die Bandenmuster unter Verwendung von mitochondrienangereicherten oder Gesamtzelllysaten aus Leber oder Niere, wo AMT stark exprimiert wird.
• Für Western Blot optimieren Sie die Verdünnung des Primärantikörpers basierend auf der Zielhäufigkeit und der Detektionsempfindlichkeit in Ihrem Proben-System; schließen Sie eine bekannte Positivkontrolle (z.B. humane HepG2- oder Mauslebermitochondrien) ein.
• Bei der Immunfluoreszenz sollten Sie eine Doppelfärbung mit einem mitochondrialen Marker (z.B. Tom20 oder MitoTracker) in Betracht ziehen, um die erwartete mitochondriale Lokalisierung zu bestätigen.
• ELISA-Anwendungen können von der Verwendung von rekombinantem AMT als Standard profitieren, um einen robusten quantitativen Assay zu etablieren; überprüfen Sie Linearität und Wiederfindung in der relevanten biologischen Matrix.

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