Anti-AMPKα2-Kaninchen-polyklonaler Antikörper für die Erforschung des Energiestoffwechsels – P54646

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von AMPKα2

• Wirkt als katalytische Untereinheit der AMP-aktivierten Proteinkinase (AMPK), eines zentralen Energiesensors, der bei ATP-Mangel das zelluläre Energiegleichgewicht wiederherstellt.
  Zugehörige Referenzen: PMID:17307971, PMID:17712357
• Phosphoryliert und inaktiviert direkt die Acetyl-CoA-Carboxylase (ACACA) und die HMG-CoA-Reduktase (HMGCR) und hemmt dadurch die Synthese von Fettsäuren und Cholesterin.
  Zugehörige Referenzen: PMID:7959015
• Fördert die Glukoseaufnahme in Muskelzellen, indem es über die Phosphorylierung von TBC1D4/AS160 die Translokation von SLC2A4/GLUT4 zur Plasmamembran erleichtert.
• Reguliert die mTORC1-Signalübertragung negativ, indem es TSC2 und RPTOR phosphoryliert und dadurch den Energiestatus mit Zellwachstum und Autophagie verknüpft.
  Zugehörige Referenzen: PMID:14651849, PMID:20160076, PMID:21205641
• Moduliert die Transkription durch die Phosphorylierung wichtiger Regulatoren wie CRTC2, FOXO3 und Histon H2B und beeinflusst dadurch die Chromatinstruktur und Genexpression.
  Zugehörige Referenzen: PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• Ist an der Insulinsignalübertragung und der Internalisierung von Rezeptoren beteiligt und beeinflusst dadurch die Glukosehomöostase.
  Zugehörige Referenzen: PMID:25687571
• Lokalisiert sich im Zytoplasma, im Zellkern und in späten Endosomen, was seine vielfältigen regulatorischen Funktionen widerspiegelt.
• Spielt eine Rolle beim zirkadianen Rhythmus durch die Phosphorylierung von CRY1 sowie bei der mitochondrialen Fragmentierung unter Stress durch die Phosphorylierung von MTFR1L.
  Zugehörige Referenzen: PMID:36367943

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäurereste 270–343 innerhalb der katalytischen Kinasedomäne des humanen PRKAA2; ziehen Sie eine Validierung der Antikörperspezifität in Knockout- oder Knockdown-Modellen in Betracht.
• Beim Western Blot wird eine Bande bei etwa 62 kDa erwartet; verwenden Sie Ganzzelllysate aus humanen und Rattengeweben oder -zelllinien entsprechend der berichteten Kreuzreaktivität.
• Bei der Immunfluoreszenz/ICC sollten die Zellen permeabilisiert werden, um sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Pools nachzuweisen; das Signal kann sich in punktförmigen Strukturen lokalisieren, die möglicherweise späten Endosomen entsprechen.
• Für ELISA sollten die Konzentration des Beschichtungsantigens und die Antikörperverdünnung unter Verwendung des rekombinanten Immunogens als Positivkontrolle optimiert werden.
• Da AMPKα2 durch Phosphorylierung reguliert wird, wird empfohlen, Phosphataseinhibitoren in die Lysepuffer aufzunehmen.

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