Anti-AMPKa1/AMPKa2 Kaninchen-Polyclonales Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - Q13131 / P54646

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von AMPK alpha-1

• AMPK alpha-1 ist die katalytische Untereinheit der heterotrimeren AMP-aktivierten Proteinkinase (AMPK), einem zentralen Energiesensor, der durch ansteigende AMP/ATP-Verhältnisse aktiviert wird. Es phosphoryliert zahlreiche nachgeschaltete Ziele, um die Energiebilanz wiederherzustellen, indem es katabolische Stoffwechselwege stimuliert und anabolische Prozesse hemmt.
  Verwandte Referenzen: PMID:17307971, PMID:17712357, PMID:24563466
• Im Lipidstoffwechsel phosphoryliert es direkt Acetyl-CoA-Carboxylase (ACACA) und HMG-CoA-Reduktase (HMGCR) und inaktiviert diese, um die Fettsäure- und Cholesterinsynthese zu unterdrücken. Es fördert außerdem die Lipolyse durch Phosphorylierung von Cholin-Kinase alpha (CHKA) an Lipidtröpfchen.
  Verwandte Referenzen: PMID:34077757
• Die Kinase stimuliert die Glukoseaufnahme im Muskel durch Erhöhung der Translokation von SLC2A4/GLUT4 zur Plasmamembran und moduliert die Glykolyse durch Phosphorylierung von PFKFB2 und PFKFB3.
• AMPK alpha-1 wirkt als Transkriptionsregulator durch Phosphorylierung von Faktoren wie CRTC2, FOXO3, p53/TP53 und Histon H2B und koppelt dadurch den Energiestatus an adaptive Genexpressionsprogramme.
  Verwandte Referenzen: PMID:11518699, PMID:11554766, PMID:15866171
• Bei Nährstoffmangel unterdrückt es die mTORC1-Signalübertragung durch Phosphorylierung von TSC2 und RPTOR und initiiert Autophagie durch Aktivierung von ULK1. Es phosphoryliert außerdem WDR24 und FNIP1, um die mTORC1-Aktivität als Reaktion auf Glukose- und Energiestress anzupassen.
  Verwandte Referenzen: PMID:14651849, PMID:18439900, PMID:20160076, PMID:36732624, PMID:37079666, PMID:21205641, PMID:28561066
• Das Protein lokalisiert sich im Zytoplasma, Kern und späten Endosomen, was mit seinen vielfältigen Funktionen übereinstimmt. Es reguliert außerdem die zelluläre Polarität und phosphoryliert ein breites Spektrum an Substraten darunter CFTR, EEF2K, CASP6 und ALDH7A1.
  Verwandte Referenzen: PMID:17486097, PMID:12519745, PMID:20074060, PMID:32029622, PMID:31492851, PMID:40233740

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen deckt eine konservierte N-terminale Region (AS 5–280) ab, die von AMPKa1 und AMPKa2 gemeinsam genutzt wird, was die angegebene Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-Orthologen unterstützt. Überprüfen Sie die Reaktivität in Ihrem spezifischen System vor großangelegten Studien.
• Erwarten Sie für den Western Blot Banden bei ungefähr 64 kDa (AMPKa1) und 65 kDa (AMPKa2). Optimieren Sie die Proteinbeladung und Blockierungsmittel, um eng beieinander liegende Banden aufzutrennen; fügen Sie ein positives Kontrolllysat hinzu.
• Bei der Immunfluoreszenz zeigt AMPK sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Färbung. Testen Sie verschiedene Fixierungsprotokolle (z. B. Methanol vs. Formaldehyd) und fügen Sie geeignete Sekundärantikörper-only-Kontrollen hinzu.
• Für ELISA erwägen Sie die Verwendung des Immunogenpeptids oder Ganzzelllysate zur Erstellung einer Standardkurve. Titrieren Sie den Antikörper, um die optimalen Arbeitskonzentrationen zu bestimmen.

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