Anti-AMPKα1-Kaninchen-polykolonaler Antikörper für WB, ELISA – Q13131

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von AMPKα1

• Zentraler Energiesensor: AMPKα1 ist die katalytische Untereinheit der AMP-aktivierten Proteinkinase, eines zentralen Energiesensors, der auf niedrige ATP-Spiegel reagiert, indem er energieerzeugende Signalwege aktiviert und die Biosynthese hemmt, wodurch die zelluläre Energiehomöostase aufrechterhalten wird. Zugehörige Referenzen: PMID:17307971 PMID:17712357 PMID:24563466
• Regulation des Lipidstoffwechsels: Es phosphoryliert und inaktiviert wichtige Enzyme des Lipidstoffwechsels wie ACACA, ACACB und HMGCR und unterdrückt dadurch die Synthese von Fettsäuren und Cholesterin. Zusätzlich fördert es durch die Phosphorylierung von CHKA die Lipolyse. Zugehörige Referenz: PMID:34077757
• Transkriptionelle und chromatinbezogene Regulation: AMPKα1 reguliert die Genexpression, indem es zahlreiche Transkriptionsfaktoren und Chromatinmodifikatoren direkt phosphoryliert (z. B. CRTC2, FOXO3, HDAC5, p53, SREBF1/2, PPARGC1A und Histon H2B), wodurch die transkriptionelle Regulation des Stoffwechsels und der Stressantwort beeinflusst wird. Zugehörige Referenzen: PMID:11518699 PMID:11554766 PMID:15866171
• Kontrolle von mTORC1 und Autophagie: Als Reaktion auf Nährstoffmangel hemmt AMPKα1 den mTORC1-Signalweg durch die Phosphorylierung von TSC2 und RPTOR. Gleichzeitig phosphoryliert es direkt die GATOR2-Untereinheit WDR24, um die durch Glukose vermittelte Aktivierung von mTORC1 zu unterdrücken. Zugleich fördert es die Autophagie durch die Aktivierung von ULK1. Zugehörige Referenzen: PMID:14651849 PMID:18439900 PMID:20160076 PMID:36732624 PMID:21205641
• Subzelluläre Lokalisation: AMPKα1 befindet sich im Zytoplasma, im Zellkern und in späten Endosomen und ermöglicht dadurch seine vielfältigen Funktionen bei der Energieerfassung, der transkriptionellen Regulation und dem vesikulären Transport.
• Posttranslationale Modifikationen und Isoformen: Als Phosphoprotein und Glykoprotein unterliegt AMPKα1 zahlreichen posttranslationalen Modifikationen, darunter Phosphorylierung und Ubiquitinierung. Das PRKAA1-Gen erzeugt durch alternatives Spleißen mehrere Isoformen, wodurch sich möglicherweise eine größere funktionelle Vielfalt ergibt.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 100–200 innerhalb der N-terminalen Kinasedomäne der menschlichen AMPKα1, einer zwischen verschiedenen Spezies hochkonservierten Region – dies steht im Einklang mit der berichteten Kreuzreaktivität bei Mäusen.
• Für den Western Blot wird eine Bande bei etwa 64 kDa erwartet. Verwenden Sie positive Kontrollen (z. B. AMPKα1-exprimierende Zelllinien) und negative Kontrollen, um die Spezifität zu bestätigen.
• Bei ELISA-Anwendungen ermöglicht die polyklonale Beschaffenheit die Erkennung mehrerer Epitope. Für Sandwich-ELISA-Ansätze kann die Kombination mit einem monoklonalen Fangantikörper in Betracht gezogen werden.
• Da die Aktivität von AMPKα1 empfindlich auf den zellulären Energiestatus reagiert, können experimentelle Bedingungen, die den AMP-Spiegel erhöhen (z. B. AICAR-Behandlung oder Glukoseentzug), die Detektion beeinflussen.
• Fügen Sie stets geeignete Kontrollen hinzu und optimieren Sie die Antikörperkonzentration für jedes Assaysystem.

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