Anti-AMPK alpha 1/2 monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - Q13131 / P54646

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AMPK alpha 1/2 Funktion und Lokalisierung

• Die AMPK katalytische Untereinheit alpha-1 (PRKAA1) fungiert als zentraler Energiesensor, der bei zellulärem Energiestress katabole Stoffwechselwege aktiviert und anabole Prozesse hemmt, um den ATP-Spiegel wiederherzustellen. Verwandte Referenzen: PMID:17307971 PMID:17712357 PMID:24563466
• Im Lipidstoffwechsel phosphoryliert AMPK direkt und inaktiviert Acetyl-CoA-Carboxylase (ACACA/ACACB) und HMG-CoA-Reduktase (HMGCR), wodurch die Fettsäure- und Cholesterinsynthese unterdrückt wird.
• AMPK steuert die transkriptionelle Umprogrammierung durch Phosphorylierung von Schlüssel-Transkriptionsfaktoren und Coaktivatoren (z.B. CRTC2, FOXO3, SREBF1, PPARGC1A) und Histon H2B und moduliert so die Expression von Stoffwechselgenen. Verwandte Referenzen: PMID:11518699 PMID:11554766 PMID:15866171
• Durch Phosphorylierung von RPTOR und TSC2 hemmt AMPK den mTORC1-Komplex, was zur Herunterregulierung von Zellwachstum und -proliferation führt, und fördert die Autophagie unter Nährstoffmangel. Verwandte Referenzen: PMID:14651849 PMID:18439900 PMID:20160076 PMID:21205641
• Subzellulär lokalisiert AMPK alpha-1 überwiegend im Zytoplasma und Zellkern und wird auch auf späten Endosomen nachgewiesen, was mit seinen vielfältigen Signalfunktionen übereinstimmt.
• Das Protein unterliegt einer umfangreichen Phosphorylierung an mehreren Serin/Threonin-Resten und kann, basierend auf Proteomik-Identifikation, N-gebundene Glykosylierung tragen.
• AMPK alpha-1 weist auch Tau-Protein-Kinase-Aktivität auf und kann MAPT/TAU in Reaktion auf Amyloid-beta phosphorylieren, obwohl die in vivo-Bedeutung unklar bleibt.
• Dieser Antikörper erkennt sowohl die katalytische Untereinheit alpha-1 (kodiert von PRKAA1, UniProt Q13131) als auch die hoch homologe Untereinheit alpha-2 (kodiert von PRKAA2, UniProt P54646), was ihn zu einem pan-AMPK-alpha-Werkzeug macht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die Reste 13–300 von humanem AMPK alpha-1, einschließlich der Kinasedomäne. Diese Region ist bei Mensch, Maus und Ratte gut konserviert, was die berichtete breite Spezies-Kreuzreaktivität unterstützt.
• Für Western Blot ist eine vorherrschende Bande bei etwa 64 kDa zu erwarten. Endogenes AMPK alpha-1 ist weit verbreitet exprimiert; erwägen Sie die Verwendung von Lysaten aus Zelllinien wie HeLa, HEK293T oder Geweben wie Leber und Skelettmuskel als positive Kontrollen.
• Bei Immunfluoreszenz und Immunhistochemie sind sowohl zytoplasmatische als auch nukleäre Signale zu erwarten. Die subzelluläre Lokalisierung kann sich unter spezifischen Stressbedingungen (z.B. Glukoseentzug, AMPK-Aktivatoren) verschieben, daher sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsprotokolle für das Zielkompartiment optimiert werden.
• Für ELISA-basierte Assays gewährleistet die monoklonale Natur dieses Antikörpers die Chargen-zu-Charge-Konsistenz; Benutzer sollten jedoch die optimalen Beschichtungs- und Detektionsbedingungen in ihrem spezifischen Assay-System validieren.

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