Monoklonaler Anti-Amphiregulin-Antikörper für WB, ELISA – P15514

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Amphiregulin

• Amphiregulin (AREG) ist ein Mitglied der Familie der epidermalen Wachstumsfaktoren (EGF) und fungiert als Ligand für den EGF-Rezeptor (EGFR).
• Es wirkt als autokriner Wachstumsfaktor und starkes Mitogen für verschiedene Zelltypen, darunter Astrozyten, Schwann-Zellen und Fibroblasten.
• Das Protein wird als Transmembranvorläufer synthetisiert und ist in der Zellmembran lokalisiert.
• Die Spaltung des membrangebundenen Vorläufers setzt die reife lösliche Form frei, die eine EGF-ähnliche Domäne enthält.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehören Glykosylierung und Disulfidbrückenbildung, die für seine Struktur und Funktion entscheidend sind.
• Zu den alternativen Bezeichnungen gehören AR, SDGF, AREGB und CRDGF (aus kolorektalen Zellen abgeleiteter Wachstumsfaktor).
• Das humane AREG-Gen (GeneID: 374) kodiert ein Protein mit einem vorhergesagten Molekulargewicht von etwa 28 kDa.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen entspricht der reifen extrazellulären Domäne (Aminosäuren 25–252), die häufig zum Nachweis von löslichem Amphiregulin in Zellüberständen oder Lysaten eingesetzt wird.
• Für den Western Blot (WB) sollten reduzierende Bedingungen in Betracht gezogen werden, um die Bande bei etwa 28 kDa aufzulösen. Es ist jedoch zu beachten, dass das Protein aufgrund von Glykosylierung und Prozessierung in verschiedenen Größen erscheinen kann.
• Bei ELISA-Anwendungen kann dieser Antikörper für die Entwicklung eines Sandwich-Paars geeignet sein, wenn er mit einem passenden Detektionsantikörper gekoppelt wird, der ein unterschiedliches Epitop erkennt.
• Eine Kreuzreaktivität mit Ratten-Amphiregulin wurde berichtet. Wenn quantitative Genauigkeit erforderlich ist, sollte die Reaktivität in den entsprechenden Probensystemen validiert werden.
• Titrieren Sie den Antikörper stets unter Ihren spezifischen Assay-Bedingungen, um die optimale Arbeitsverdünnung zu bestimmen.

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