Anti-AMBRA1 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - Q9C0C7

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AMBRA1-Funktion und -Lokalisierung

• AMBRA1 ist die Substrat-Erkennungskomponente eines DCX (DDB1-CUL4-X-box) E3-Ubiquitin-Protein-Ligase-Komplexes und vermittelt die Polyubiquitinierung von Zielproteinen, die am Zellzyklusfortschritt und an der Autophagie beteiligt sind. Verwandte Referenzen: PMID:20921139, PMID:23524951, PMID:24587252
• Fungiert als upstream master regulator des G1/S-Übergangs, indem es phosphoryliertes Cyclin-D (CCND1, CCND2, CCND3) erkennt und diese für eine ubiquitinabhängige Degradation markiert, wodurch es als Tumorsuppressor wirkt. Verwandte Referenzen: PMID:33854232, PMID:33854235, PMID:33854239
• Wirkt als Schlüsselregulator der Autophagie; nach Induktion der Autophagie wird es vom Zytoskelett freigesetzt, um die 'Lys-63'-verknüpfte Ubiquitinierung von BECN1 und ULK1 zu vermitteln, wodurch die PIK3C3-Aktivität und die ULK1-Stabilität verbessert werden, um die Bildung von Autophagosomen zu fördern. Verwandte Referenzen: PMID:20921139, PMID:23524951
• Fördert die Mitophagie durch Interaktion mit PRKN und LC3-Familienproteinen, um geschädigte Mitochondrien für Autophagosomen zu markieren, und wirkt als Kofaktor für die HUWE1-vermittelte Ubiquitinierung von MFN2. Verwandte Referenzen: PMID:21753002, PMID:25215947, PMID:30217973
• Unabhängig von seiner E3-Ligase-Funktion reguliert AMBRA1 die Stabilität von MYC und FOXO3 durch Interaktionen mit der Proteinphosphatase 2A (PPP2CA), was zum Abbau von MYC und zur Stabilisierung von FOXO3 führt und somit die Zellproliferation und die Differenzierung regulatorischer T-Zellen beeinflusst. Verwandte Referenzen: PMID:25438055, PMID:25803737, PMID:30513302
• Die subzelluläre Lokalisierung umfasst Zytoplasma, Zytoskelett, endoplasmatisches Retikulum, Autophagosomen, Mitochondrien, Zellkern und Fokaladhäsionen, was seine vielfältigen Rollen im zellulären Transport und in der Signalübertragung widerspiegelt.
• Wird posttranslational durch Methylierung und Phosphorylierung modifiziert und enthält WD-Repeats; es ist auch an der Assembly von 'Lys-63'-verknüpften Polyubiquitinketten beteiligt, was für die Signaltransduktion kritisch ist.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 961–1208 von menschlichem AMBRA1; daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich Epitope innerhalb dieses Bereichs. Im Western Blot ist ein Band bei ca. 143 kDa zu erwarten. Optimieren Sie die Blockier- und Waschbedingungen, um den Hintergrund zu minimieren.
• Die bestätigte Kreuzreaktivität mit der Maus macht diesen Antikörper geeignet für Mausmodell-Studien; validieren Sie jedoch den Nachweis im spezifischen Gewebe oder Zelltyp von Interesse, um Spezifität und Empfindlichkeit sicherzustellen.
• Für ELISA-Anwendungen sollten die Vorbeschichtungsbedingungen und Detektionssysteme empirisch optimiert werden; erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem AMBRA1-Protein oder Zelllysaten als Beschichtungsantigene.
• Aufgrund alternativen Spleißens können in bestimmten Zelltypen mehrere AMBRA1-Isoformen existieren; überprüfen Sie das detektierte Bandmuster anhand bekannter Kontrollen in Ihrem experimentellen System.
• Dieser polyklonale Antikörper kann mit zusätzlicher Validierung für Immunpräzipitation oder Immunfluoreszenz verwendet werden; eine unspezifische Bindung an andere WD-repeat-haltige Proteine ist unwahrscheinlich, sollte aber durch geeignete Kontrollen ausgeschlossen werden.

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