Anti-AMBP polyklonaler Kaninchen-Antikörper für WB, ELISA - P02760

Kernspezifikationen und Parameter des Produkts

Biologischer Hintergrund: AMBP-Funktion und Lokalisierung

• Das AMBP-Gen kodiert ein Vorläuferprotein, das in zwei funktionelle Ketten gespalten wird: Alpha-1-Mikroglobulin (Protein HC/A1M) mit antioxidativen und gewebereparierenden Aktivitäten sowie Bikunin, ein Serinprotease-Inhibitor vom Kunitz-Typ.
• Alpha-1-Mikroglobulin (A1M) weist Reduktase-, Häm-bindende und radikalfangende Aktivitäten auf. Es reduziert extrazelluläres Methämoglobin, bindet und baut freies Häm ab, um Hämolyse zu verhindern, und schützt vor oxidativem Schaden an Lipoprotein-Partikeln niedriger Dichte sowie extrazellulären Matrixstrukturen. Zugehörige Referenzen: PMID:11877257 PMID:15683711 PMID:22096585 PMID:32092412 PMID:25698971
• In Mitochondrien assoziiert A1M mit Komplex I der Atmungskette und erhält die Redox-Homöostase aufrecht, indem es freie Radikale abfängt und Cytochrom c von Fe3+ zu Fe2+ reduziert. Zugehörige Referenzen: PMID:23157686 PMID:32823731
• Bikunin fungiert als Serinprotease-Inhibitor vom Kunitz-Typ und hemmt effektiv Kallikrein, Granzym K, Plasmin, Faktor Xa, Trypsin, Chymase und Tryptase. Es spielt eine Rolle bei der Modulation von Atemwegsentzündungen und zytotoxischen Reaktionen. Zugehörige Referenzen: PMID:10480954 PMID:15917224 PMID:16873769
• Bikunin ist zudem ein struktureller Bestandteil der extrazellulären Matrix und trägt zum Umbau des extrazellulären Raums sowie zur Zelladhäsion bei. Es bildet einen Teil des Inter-alpha-Trypsin-Inhibitor-Komplexes, erleichtert den Transfer der schweren Kette auf Hyaluronan und hemmt die Kristallisation von Calciumoxalat. Zugehörige Referenzen: PMID:20463016 PMID:25301953 PMID:16873769 PMID:7676539
• AMBP wird weitgehend von der Leber exprimiert und in Plasma, Urin und Zerebrospinalflüssigkeit sezerniert. Es wird auch in roten Blutkörperchen, Plazentagewebe, Keratinozyten, Dermis und Atemwegsepithel nachgewiesen. Subzellulär lokalisiert es sich im extrazellulären Raum, endoplasmatischen Retikulum, Zytoplasma, der Zellmembran, der Kernmembran und der inneren Mitochondrienmembran.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen umfasst die Aminosäuren 20-202 des humanen AMBP und deckt die Alpha-1-Mikroglobulin (A1M)-Kette ab. Es ist zu erwarten, dass der Antikörper A1M erkennt und möglicherweise auch den vollständigen Vorläufer detektiert; berücksichtigen Sie dies bei der Interpretation von Banden im Western Blot.
• Im WB hat das vollständige AMBP ein vorhergesagtes Molekulargewicht von ~39 kDa; prozessierte Ketten oder glykosylierte Formen können jedoch bei anderen Größen erscheinen. Verwenden Sie geeignete Molekulargewichtsmarker und berücksichtigen Sie reduzierende gegenüber nicht-reduzierenden Bedingungen.
• Für ELISA-Anwendungen kann dieser polyklonale Antikörper als Detektionsreagenz verwendet werden. Wenn ein Sandwich-ELISA-Format gewünscht ist, kann die Paarung mit einem monoklonalen Fängerantikörper, der spezifisch für ein anderes Epitop ist, die Spezifität des Assays verbessern.
• Der Antikörper kreuzreagiert mit Maus-AMBP, was auf eine potenzielle Epitop-Konservierung hindeutet. Eine Validierung in Proben aus Mausgewebe wird vor der Verwendung in Maus-Experimentalsystemen empfohlen.
• Aufgrund der vorhandenen Disulfidbrücken in Bikunin können nicht-reduzierende Bedingungen erforderlich sein, um die Epitoperkennung zu bewahren, falls die Bikunin-Kette das Ziel ist.

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