Anti-ALPI (IAP) Polyclonale Antikörper für WB, ELISA – P09923

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ALPI

• ALPI (intestinale Typ alkalische Phosphatase) ist ein membrangebundenes Glykoprotein, das die Hydrolyse von Phosphatmonoestern bei alkalischem pH katalysiert.
• Es ist über einen Glykosylphosphatidylinositol (GPI)-Anker an die äußere Schicht der Zellmembran verankert, was seine Funktion an der Zelloberfläche ermöglicht.
• Die katalytische Aktivität des Enzyms hängt von zweiwertigen Metallionen ab, darunter Zink, Magnesium und Kalzium, die im aktiven Zentrum koordiniert werden.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen die Bildung von Disulfidbindungen und N-gebundene Glykosylierung, die für die korrekte Faltung und Stabilität entscheidend sind.
• ALPI ist das intestinale Isozym der Familie der alkalischen Phosphatasen und kann an der Darmmukosaabwehr durch Dephosphorylierung bakterieller Endotoxine teilnehmen.
• Es wird als Hydrolase innerhalb der Familie der alkalischen Phosphatasen klassifiziert und ist als Forschungswerkzeug für die Untersuchung der Darmlbiologie und des Phosphatstoffwechsels weit verbreitet.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem rekombinanten Fragment, das die Aminosäuren 20–200 von menschlichem ALPI abdeckt; der resultierende polyklonale Antikörper erkennt native und denaturierte Formen, wie durch validierte Western-Blot- und ELISA-Anwendungen belegt.
• Für den Western Blot ist eine Bande um 57 kDa zu erwarten; dennoch kann gewebespezifische Glykosylierung leichte Verschiebungen im apparenten Molekulargewicht verursachen.
• Aufgrund der Kreuzreaktivität mit Mensch und Maus können Sie diesen Antikörper für Studien an beiden Spezies in Betracht ziehen, validieren Sie ihn aber immer im relevanten Probensystem mit geeigneten Kontrollen.
• Optimieren Sie die Blockierung und Antikörperverdünnung empirisch für jede Anwendung und schließen Sie eine Positivkontrolle ein, die bekanntlich ALPI exprimiert (z. B. Darmgewebslysate).

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