Anti-Alpha-Fetoprotein-(AFP)-monoklonaler Antikörper für WB, ELISA – P02771

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation des Alpha-Fetoproteins

• Alpha-Fetoprotein (AFP) ist ein sezerniertes Plasmaprotein, das als Träger für Metallionen, Fettsäuren und Bilirubin fungiert.
• Es bindet Kupfer und Nickel sowie in geringerem Maße Bilirubin im Vergleich zu Serumalbumin.
• AFP wird hauptsächlich von der fetalen Leber und dem Dottersack synthetisiert, und seine Plasmaspiegel sinken nach der Geburt ab.
• Ein geringer Anteil des humanen AFP (<2 %) weist eine Östrogenbindungskapazität auf.
• Das Protein durchläuft posttranslationale Modifikationen, einschließlich Glykosylierung, Phosphorylierung und Sulfatierung.
• Es enthält Disulfidbindungen und strukturelle Wiederholungen, die zu seiner stabilen sezernierten Konformation beitragen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht dem vollständigen reifen AFP (Aminosäurereste 19–609), wodurch wahrscheinlich Antikörper erzeugt werden, die sowohl native als auch denaturierte Formen erkennen; berücksichtigen Sie dies bei der Versuchsplanung.
• Für WB beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 69 kDa; überprüfen Sie die Bande in Ihrem spezifischen Probenlysat, da die Glykosylierung geringfügige Größenverschiebungen verursachen kann.
• Da AFP ein sezerniertes Protein ist, stellen Sie sicher, dass die Probenvorbereitung (z. B. Serum, Zellüberstand) für den Nachweis geeignet ist.
• Validieren Sie die Antikörperspezifität mithilfe geeigneter positiver (z. B. HepG2-Zelllysat, humanes Serum) und negativer Kontrollen.
• Für ELISA kann die Kombination mit einem Fangantikörper optimiert werden; testen Sie das Verfahren im Sandwich-ELISA-Format unter Verwendung eines rekombinanten AFP-Standards.

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