Polyklonaler Anti-Alpha-2-Makroglobulin (A2M)-Antikörper für WB – P01023

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Alpha-2-Makroglobulin (A2M)

• Alpha-2-Makroglobulin (A2M) ist ein großes Plasmaglykoprotein und Mitglied der Alpha-Makroglobulin-Familie, auch bekannt als C3- und PZP-ähnliches Alpha-2-Makroglobulin-Domänen-enthaltendes Protein 5 (CPAMD5).
• A2M wirkt als breitspektrischer Proteaseinhibitor, der alle vier Klassen von Proteinasen (Serin-, Cystein-, Aspartat- und Metalloproteinasen) über einen einzigartigen „Fang“-Mechanismus hemmen kann.
• Das Protein enthält eine „Köderregion“ mit spezifischen Spaltungsstellen; nach proteolytischer Spaltung fängt eine Konformationsänderung die Protease ein, und eine Thioesterbindung vermittelt die kovalente Bindung an das Enzym.
• Nach der Spaltung bleibt die eingeschlossene Protease gegenüber niedermolekularen Substraten aktiv, zeigt aber stark reduzierte Aktivität gegenüber hochmolekularen Substraten.
• A2M wird in das Blutplasma sezerniert und fungiert als wichtiger extrazellulärer Protease-Fänger, der zur Regulation von Koagulation, Fibrinolyse und Entzündung beiträgt.
• Das Protein weist mehrere strukturelle Merkmale auf, darunter ein Signalpeptid, Disulfidbindungen, Glykosylierungsstellen und eine interne Thioesterbindung; seine reife Molekularmasse beträgt etwa 163 kDa.
• Dreidimensionale Strukturstudien haben die Konformationsänderungen aufgeklärt, die dem Fangmechanismus zugrunde liegen.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen wurde gegen ein rekombinantes Fragment entsprechend den Aminosäuren 1155–1474 entwickelt, das die C-terminale Rezeptorbindungsdomäne enthält; berücksichtigen Sie dies bei der Beurteilung der Antikörperreaktivität mit verschiedenen A2M-Konformationen oder Fragmenten.
• Für Western Blot (WB) ist eine Bande bei ~163 kDa unter reduzierenden oder nicht-reduzierenden Bedingungen zu erwarten; validieren Sie die Detektion im entsprechenden Probensystem und erwägen Sie eine Voradsorption für hohe Spezifität.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) sollten geeignete Antigen-Retrieval-Methoden und Gewebefixierungsbedingungen experimentell optimiert werden.
• Für ELISA kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden; die Paarung mit einem anderen Klon oder Konjugat sollte im spezifischen Assayformat validiert werden.
• Kreuzreaktivität mit anderen Mitgliedern der Alpha-Makroglobulin-Familie (z. B. Schwangerschaftszonenprotein) wurde nicht getestet; bestätigen Sie die Spezifität bei Bedarf.

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