Anti-Alpha-2-Makroglobulin (A2M) monoklonaler Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P01023

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von Alpha-2-Makroglobulin (A2M)

• Alpha-2-Makroglobulin (A2M) ist ein großes Plasmaproteinglykoprotein, das vom A2M-Gen (auch bekannt als CPAMD5) kodiert wird und zur Alpha-Makroglobulin-Familie gehört, zu der auch C3- und PZP-ähnliche Proteine gehören.
• A2M fungiert als Breitband-Protease-Inhibitor, der durch einen einzigartigen „Fang“-Mechanismus alle vier Klassen von Proteinasen (Serin-, Cystein-, Aspartat- und Metalloproteinasen) hemmen kann.
• Der Fangmechanismus beinhaltet eine Köderregion, die spezifische Spaltstellen enthält; nach proteolytischer Spaltung fängt eine Konformationsänderung die Protease ein, blockiert den Zugang zu hochmolekularen Substraten und lässt die Aktivität gegenüber kleinen Substraten intakt.
• Nach der Spaltung der Köderregion wird eine Thioesterbindung innerhalb von A2M hydrolysiert, was zur kovalenten Bindung des Proteins an die gefangene Protease führt, die anschließend aus der Zirkulation entfernt wird.
• A2M wird sezerniert und hauptsächlich im Plasma gefunden, wo es als wichtiger Regulator der proteolytischen Aktivität im Blutstrom und in den Geweben dient.
• Das Protein unterliegt posttranslationalen Modifikationen, einschließlich Glykosylierung sowie der Bildung von Disulfidbindungen und der charakteristischen Thioesterbindung, die für seine Protease-Fang-Funktion unerlässlich ist.
• A2M verfügt auch über eine Isopeptidbindung und wurde als Serinprotease-Inhibitor identifiziert; seine Struktur wurde gelöst und es ist eine Komponente der Referenzproteoms.
• Als sezerniertes Glykoprotein mit einem Molekulargewicht von ca. 163 kDa spielt A2M eine entscheidende Rolle bei der angeborenen Immunität, Entzündungen und dem Geweberemodelling durch die Kontrolle übermäßiger Proteolyse.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen erstreckt sich über die Reste 1200–1300 im C-terminalen Bereich; berücksichtigen Sie diesen Epitoport bei der Gestaltung von Blockierungs- oder Wettbewerbsassays.
• Für den Western Blot ist ein Band bei ~163 kDa zu erwarten; optimieren Sie den Gelanteil und die Transferbedingungen, um ein effizientes Blotting von hochmolekularen Proteinen zu gewährleisten.
• Dieser Antikörper ist geeignet für ELISA und IHC an Paraffin-eingebetteten Schnitten; validieren Sie im relevanten Probensystem mit geeigneten Kontrollen.
• Eine Kreuzreaktivität mit Maus- und Ratten-A2M wurde berichtet, aber eine Sequenzausrichtung sollte überprüft werden, wenn quantitative Vergleiche zwischen den Spezies erforderlich sind.

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