Anti-alpha-1-Spectrin-Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB & ELISA – P02549

Zentrale Produktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Alpha-1-Spectrin

• Das vom SPTA1-Gen kodierte Protein ist die Spectrin-Alpha-Kette 1 der Erythrozyten, auch als erythroide Alpha-Spectrin bezeichnet. Es ist ein wichtiger struktureller Bestandteil des Zytoskeletts der Erythrozytenmembran.
• Spectrin ist der Hauptbestandteil des zytoskelettalen Netzwerks unterhalb der Plasmamembran der Erythrozyten. Dort verbindet es sich mit Band 4.1 und Aktin zu einer übergeordneten Struktur, die Zellform und Elastizität aufrechterhält.
• Die Alpha-Spectrin-Kette enthält mehrere Spectrin-Wiederholungen, eine SH3-Domäne und ein calcium-bindendes EF-Hand-Motiv, wodurch sie Aktin binden und das kortikale Zytoskelett organisieren kann.
• Auf subzellulärer Ebene ist Alpha-1-Spectrin im Zytoplasma, im Zytoskelett und im Zellkortex lokalisiert, was seiner Funktion bei der Unterstützung der Plasmamembran entspricht.
• Mutationen in SPTA1 stehen mit hereditärer Elliptozytose und Pyropoikilozytose in Zusammenhang und unterstreichen die kritische Funktion des Proteins für die Integrität der Erythrozyten.
• Zu den posttranslationalen Modifikationen gehört die Phosphorylierung, die möglicherweise Spectrin-Interaktionen und die Dynamik des Zytoskeletts reguliert.
• Alternatives Spleißen von SPTA1 führt zu mehreren Isoformen mit gewebespezifischen Expressionsmustern.

Experimentelle Anleitung und technische Hinweise

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das einer internen Region (Aminosäuren 2300–2400) entspricht, was darauf hindeutet, dass der Antikörper ein lineares Epitop erkennt. Für den Western Blot sollte ein denaturierendes Gelsystem verwendet und die Transferbedingungen für Proteine mit hohem Molekulargewicht (~280 kDa) optimiert werden.
• Aufgrund des vorhergesagten Molekulargewichts von 280 kDa können ein Polyacrylamidgel mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6–8 %) und verlängerte Transferzeiten die Detektion verbessern. Geeignete Molekulargewichtsmarker sollten eingeschlossen werden, um die Bandengröße zu bestätigen.
• Die Kreuzreaktivität des Antikörpers mit Mensch, Maus und Ratte weist auf eine Konservierung der Epitopsequenz hin. Die Leistung des Antikörpers sollte in relevanten Probenlysaten (z. B. aus Erythrozyten oder erythroleukämischen Zelllinien) validiert werden, um die Spezifität zu bestätigen.
• Für ELISA-Anwendungen unterstützt das Design des Peptid-Immunogens direkte oder indirekte Testformate. Optimieren Sie die Beschichtungsbedingungen und verwenden Sie, sofern verfügbar, rekombinantes oder gereinigtes Alpha-1-Spectrin als Positivkontrolle.

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