Anti-ALKBH5 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q6P6C2

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ALKBH5-Funktion und Lokalisierung

• ALKBH5 katalysiert die oxidative Demethylierung von m6A in RNA, eine Reaktion, die von molekularem Sauerstoff, Alpha-Ketoglutarat und Eisen abhängt, und kehrt so die m6A-Modifikation auf mRNA um.
  Verwandte Referenzen: PMID:21264265 PMID:23177736 PMID:24489119
• Durch seine Demethylase-Aktivität moduliert ALKBH5 die mRNA-Verarbeitung, -Translation und -Export und stellt einen kritischen Regulator des Epitranskriptoms dar.
  Verwandte Referenzen: PMID:23177736 PMID:34048572 PMID:36944332
• ALKBH5 kann in vitro auch N(6)-Methyladenosin in einzelsträngiger DNA demethylieren, was auf ein breiteres Substratpotenzial hindeutet.
  Verwandte Referenzen: PMID:24616105
• Es spielt eine wesentliche Rolle in der Spermatogenese, die für späte meiotische und haploide Phasen erforderlich ist; die m6A-Demethylierung durch ALKBH5 in Spermatozyten und runden Spermatiden gewährleistet korrektes Spleißen und die Produktion längerer 3'-UTR-mRNAs in männlichen Keimzellen.
• ALKBH5 ist an der Paraspeckle-Bildung, einem kernlosen membranglosen Organell, durch Flüssig-Flüssig-Phasentrennung beteiligt, wobei seine Demethylase-Aktivität auf NEAT1-nicht-kodierender RNA integral für diesen Prozess ist.
  Verwandte Referenzen: PMID:37369679 PMID:37474102
• Als negativer Regulator der T-Zell-Entwicklung hemmt ALKBH5 die Gamma-Delta-T-Zell-Proliferation durch Demethylierung von JAG1- und NOTCH2-Transkripten und unterdrückt die Rekrutierung regulatorischer T-Zellen über CCL28-mRNA-Destabilisierung.
• Subzellulär lokalisiert ALKBH5 in nukleären Speckles und dem Nukleoplasma, was mit seinen Funktionen in der RNA-Verarbeitung und der Dynamik nukleärer Körper übereinstimmt.
• Acetylierung, Phosphorylierung und Ubiquitin-Konjugation gehören zu den posttranslationalen Modifikationen, die für ALKBH5 annotiert sind und seine Stabilität und Aktivität regulieren können.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen (Aminosäuren 66-394 von humanem ALKBH5) umfasst einen großen Teil des Proteins; ziehen Sie für kritische Anwendungen die Überprüfung der Spezifität in Knockout- oder Knockdown-Modellen in Betracht.
• Für Western Blotting wird ein Band bei etwa 44 kDa erwartet; verwenden Sie Lysate aus Geweben mit hoher ALKBH5-Expression (z. B. Lunge, Hoden) als positive Kontrollen.
• Optimieren Sie bei ELISA die Beschichtungsantigenkonzentration und die Antikörperverdünnung, um einen linearen Nachweis zu erreichen und den Hintergrund zu minimieren.
• Bestätigen Sie aufgrund der nukleären Lokalisierung des Enzyms, dass die Lyse- und Extraktionsprotokolle bei der Herstellung von Lysaten für den Nachweis angemessen sind.

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