Anti-ALKBH1 Kaninchen-Polyclonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q13686

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung von ALKBH1

• ALKBH1 ist eine Nukleinsäure-Dioxygenase, die auf DNA und tRNA wirkt und molekularen Sauerstoff, alpha-Ketoglutarat und Eisen als Kofaktoren benötigt. Zugehörige Referenzen: PMID:18603530 PMID:27497299
• Es wirkt hauptsächlich als tRNA-Demethylase, die N1-Methyladenin aus verschiedenen tRNAs entfernt, mit Präferenz für Position 58 (m1A58) in der T-Schleife, und reguliert dadurch die Translationsinitiation und -elongation. Zugehörige Referenzen: PMID:27745969
• In Mitochondrien oxidiert ALKBH1 mt-tRNA(Met) an Cytosin(34) zu 5-Formylcytosin, wodurch die Codonerkennung erweitert wird, um zusätzlich zu AUG auch AUA zu lesen. Zugehörige Referenzen: PMID:27497299
• ALKBH1 demethyliert zudem N6-Methyladenin in DNA, insbesondere an L1-Repetitivelementen in embryonalen Stammzellen, und trägt so zur Genstilllegung bei. Zugehörige Referenzen: PMID:30017583 PMID:30392959
• ALKBH1 weist DNA-Lyase-Aktivität auf, spaltet abasische Stellen in der DNA und erzeugt dadurch kovalente Protein-DNA-Addukte; diese Aktivität erfordert kein alpha-Ketoglutarat. Zugehörige Referenzen: PMID:19959401 PMID:23577621
• Das Protein lokalisiert sowohl im Zellkern als auch in den Mitochondrien.
• ALKBH1 wird ubiquitär in allen menschlichen Geweben exprimiert.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 110-389 des humanen ALKBH1, einer Region, die die katalytische Domäne umfasst. Dieses Design kann eine starke Reaktivität gegen das Volllängenprotein vermitteln.
• Für Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 44 kDa. Zusätzliche Banden können aufgrund von alternatives Spleißen, posttranslationalen Modifikationen oder der Detektion von Homologen wie der Maus-Alkbh1 auftreten.
• Bei Immunfluoreszenz/Immuncytochemie ist eine Färbung sowohl im Kern als auch in den Mitochondrien zu erwarten, was der doppelten Lokalisation von ALKBH1 entspricht.
• Bei der Immunpräzipitation beachten Sie, dass ALKBH1 mit Nukleinsäuren interagiert; fügen Sie bei Bedarf eine Nukleasebehandlung hinzu.
• Die ELISA-Leistung sollte mit dem rekombinanten Antigen oder relevanten Zell-/Gewebslysaten validiert werden; berücksichtigen Sie Matrixeffekte in komplexen Proben.
• Eine Kreuzreaktivität mit murinem ALKBH1 ist zu erwarten, aber bestätigen Sie bei Bedarf die Sequenzidentität in der Immunogenregion für andere Spezies.

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