Anti-ALKBH1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IP, IHC-P, ELISA - Q13686

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ALKBH1-Funktion und -Lokalisierung

• ALKBH1 ist eine Nukleinsäuredioxygenase, die auf DNA und tRNA wirkt und molekularen Sauerstoff, Alpha-Ketoglutarat und Eisen benötigt. Verwandte Referenzen: PMID:18603530, PMID:27497299
• Funktioniert primär als tRNA-Demethylase, entfernt N1-Methyladenin (m1A) aus tRNAs, insbesondere an Position 58 (m1A58), und reguliert die Translationsinitiation und -elongation als Reaktion auf Glukosemangel. Verwandte Referenzen: PMID:27745969
• In den Mitochondrien oxidiert ALKBH1 mt-tRNA(Met) an Cytosin 34 zu 5-Formylcytosin (f5C) und erweitert so die Codon-Erkennung für AUA/AUG. Verwandte Referenzen: PMID:27497299
• Demethyliert DNA N6-Methyladenin (m6A) an L1-Elementen in embryonalen Stammzellen und potenziell stilllegt diese. Verwandte Referenzen: PMID:30017583, PMID:30392959
• Demethyliert mRNA N3-Methylcytidin (m3C) Modifikation. Verwandte Referenzen: PMID:31188562
• Verfügt auch über DNA-Lyase-Aktivität, führt doppelsträngige Brüche an apurinischen/apyrimidinischen (abasischen) Stellen unabhängig von Alpha-Ketoglutarat und Eisen ein und bildet ein kovalentes Addukt. Verwandte Referenzen: PMID:19959401, PMID:23577621
• Subzelluläre Lokalisierung: Zellkern und Mitochondrien.
• Ubiquitär exprimiert; könnte eine Rolle bei der Differenzierung der plazentaren Trophoblasten-Linie spielen (Nach Homologie).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht der N-terminalen Region (aa 1–100), was darauf hindeutet, dass das全长-Nativprotein und potenziell bestimmte Isoformen, die diese Region enthalten, erkannt werden. Validieren Sie die Spezifität im entsprechenden Probensystem.
• Für Western Blotting ist ein Band bei ca. 44 kDa zu erwarten. Verwenden Sie geeignete Ladungskontrollen und bestätigen Sie die Kreuzreaktivität mit Lysaten von Mensch, Maus und Ratte.
• Für die Immunpräzipitation (IP) werden ein Vor-Clearing und optimierte Antikörper-zu-Lysat-Verhältnisse empfohlen, um unspezifische Bindungen zu minimieren.
• Für die Immunhistochemie (IHC-P) müssen die Bedingungen für die Antigen-Retrieval aufgrund der nukleären/mitochondrialen Lokalisierung möglicherweise optimiert werden. Erwägen Sie, sowohl die Standard-Citrat- als auch EDTA-basierte Retrieval zu testen.
• In ELISA verwenden Sie bei der Entwicklung eines Sandwich-Assays einen Detektionsantikörper, der ein anderes Epitop erkennt, und validieren Sie Linearität und Empfindlichkeit mit rekombinantem Protein oder Peptidstandards.

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