Anti-ALKBH1 Kaninchen monoklonaler Antikörper für WB, IP, IF/ICC, ELISA - Q13686

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ALKBH1

• ALKBH1 ist eine Nukleinsäure-Dioxygenase abhängig von Fe(II), α-Ketoglutarat und molekularem Sauerstoff und ist das menschliche Homolog von E. coli AlkB.
  Verwandte Referenzen: PMID:18603530, PMID:27497299
• Es vermittelt die Demethylierung von N(1)-Methyladenin (m1A) an Position 58 verschiedener tRNAs und reguliert die Translationsinitiation und -elongation als Reaktion auf Glukoseentzug.
  Verwandte Referenzen: PMID:27745969
• In Mitochondrien oxidiert ALKBH1 spezifisch 5-Methylcytosin (m5C) an Position 34 der mt-tRNA(Met) zu 5-Formylcytosin (f5C) und erweitert so die Kodonerkennung während der mitochondrialen Translation.
  Verwandte Referenzen: PMID:27497299
• ALKBH1 fungiert als DNA N6-Methyladenin (6mA) Demethylierase an L1 Retrotransposons in embryonalen Stammzellen und trägt potenziell zur epigenetischen Stummschaltung bei.
  Verwandte Referenzen: PMID:30017583, PMID:30392959
• Es demethyliert zudem N(3)-Methylcytidin (m3C) in mRNA, wodurch seine Rolle bei der RNA-Modifizierung erweitert wird.
  Verwandte Referenzen: PMID:31188562
• Zusätzlich besitzt ALKBH1 eine DNA-Lyase-Aktivität, die DNA an abasischen Stellen unabhängig von seiner Dioxygenase-Funktion schneidet und Doppelstrangbrüche erzeugt.
  Verwandte Referenzen: PMID:19959401, PMID:23577621
• ALKBH1 ist sowohl im Kern als auch in den Mitochondrien lokalisiert, was seine vielfältigen Funktionen bei der Nukleinsäuremodifikation kompartimentiert.
• ALKBH1 wird ubiquitär in allen menschlichen Geweben exprimiert und kann zudem eine Rolle bei der Differenzierung der plazentaren Trophoblastenlinie spielen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 290-389 des menschlichen ALKBH1 umfasst. Alternative Immunogene, die andere Regionen targetieren, können Antikörper mit unterschiedlichen Epitopspezifitäten ergeben.
• Für das Western Blotting ist unter reduzierenden Bedingungen eine Bande zu erwarten, die dem vorhergesagten Molekulargewicht von ~44 kDa entspricht. Überprüfen Sie die Bandenspezifität mit geeigneten Kontrollen.
• Bei der Immunpräzipitation kann der Antikörper potenziell menschliches, Maus- und Ratten-ALKBH1-Protein binden; optimieren Sie das Verhältnis von Antikörper zu Lysat.
• Für Immunfluoreszenz/ICC können Kolokalisationsstudien mit organellenspezifischen Markern die nukleäre und mitochondriale Verteilung von ALKBH1 bestätigen.
• Bei ELISA-Anwendungen kann die Verwendung von rekombinantem ALKBH1-Protein oder Peptid als Capture-Antigen von Vorteil sein; titrieren Sie den Antikörper für optimale Sensitivität.

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