Anti-Alkalische Phosphatase (ALPL) Kaninchen-Polyclonales Antikörper für WB, IF-P, IHC-P, ELISA - P05186

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Alkalischen Phosphatase (ALPL)

• Alkalische Phosphatase, gewebsunspezifische Isozym (ALPL), auch bekannt als Leber/Knoche/Niere Alkalische Phosphatase, wird vom ALPL-Gen kodiert und gehört zur Familie der Alkalischen Phosphatasen.
• Es wirkt als Hydrolase mit breiter Substratspezifität und dephosphoryliert Verbindungen wie anorganisches Pyrophosphat (PPi), Pyridoxal-5'-phosphat (PLP) und N-Phosphokreatin. Verwandte Referenzen: PMID:12162492, PMID:2220817
• Essenziell für die skelettale und dentale Mineralisierung: Durch Hydrolyse von extrazellulärem PPi, einem Inhibitor der Mineralisierung, zu Phosphat wird die Bildung von Hydroxylapatit-Kristallen gefördert. Verwandte Referenzen: PMID:23688511, PMID:25982064
• Es katalysiert die Dephosphorylierung von PLP zu Pyridoxal, der transportfähigen Form von Vitamin B6, die für die Neurotransmittersynthese im Gehirn entscheidend ist. Verwandte Referenzen: PMID:20049532, PMID:2220817
• Es ist über einen GPI-Anker an der Zellmembran lokalisiert und assoziiert außerdem mit extrazellulären Vesikeln, der mitochondrialen Membran und dem Intermembranraum, wo es den lokalen Phosphatstoffwechsel vermittelt.
• Es ist posttranslational modifiziert mit Glykosylierung, Disulfidbindungen und Metallbindungsstellen für Zink und Magnesium, die für seine katalytische Aktivität essenziell sind.
• Mutationen in ALPL sind mit Hypophosphatasie verbunden, einer metabolischen Knochenerkrankung, was seine zentrale Rolle bei der Biomineralisierung unterstreicht.
• Darüber hinaus kann ALPL mikrobielle Produkte wie Lipopolysaccharide (LPS) dephosphorylieren, was auf eine Rolle bei der Modulation von angeborenen Immunantworten hindeutet. Verwandte Referenzen: PMID:28448526

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Für Western Blotting empfehlen wir eine Startverdünnung von 1:500–1:2000 und die Validierung in menschlichen, Maus- oder Ratten-Gewebslysaten, die ALPL exprimieren, wie z. B. Knochen, Leber oder Niere.
• Für Immunhistochemie (IHC-P) kann Antigen-Retrieval mit Citratpuffer das Signal verbessern; testen Sie in bekannten positiven Geweben wie Osteoblasten oder Hepatozyten.
• Bei Immunfluoreszenz (IF-P) verwenden Sie eine geeignete Permeabilisierung und validieren Sie die Kolokalisierung mit Membran- oder extrazellulären Vesikel-Markern.
• Für ELISA kombinieren Sie den Antikörper mit einem passenden Detektionsantikörper und testen Sie ihn mit rekombinantem ALPL-Protein oder biologischen Proben mit Alkalische Phosphatase-Aktivität.
• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 120–260, die innerhalb der katalytischen Domäne liegen; der Antikörper kann sowohl membrangebundene als auch lösliche Formen erkennen.
• Aufgrund der hohen Homologie zwischen den Arten ist eine Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte zu erwarten, aber validieren Sie das Ergebnis immer in Ihrem spezifischen Probensystem.

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