Anti-Alkalische Phosphatase (ALPL) Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, ELISA - P05186

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation der Alkalischen Phosphatase (ALPL)

• Die gewebespezifische nicht-spezifische Isoenzym der Alkalischen Phosphatase (ALPL) wird wie der alternative Name bereits sagt in Leber, Knochen und Niere exprimiert.
• Es katalysiert die Hydrolyse von Diphosphat (PPi) zu Phosphat, entfernt dadurch einen starken Inhibitor der Mineralisierung und fördert so die Bildung von Hydroxylapatitkristallen in Knochen und Zähnen. Zugehörige Referenzen: PMID:12162492, PMID:23688511, PMID:25982064
• ALPL dephosphoryliert Pyridoxal 5′-phosphat (PLP) zu Pyridoxal (PL), der transportfähigen Form von Vitamin B6, die für die Neurotransmittersynthese im Gehirn essenziell ist. Zugehörige Referenzen: PMID:20049532, PMID:2220817
• Das Enzym ist an der Zellmembran, den Membranen extrazellulärer Vesikel und den mitochondrialen Membranen lokalisiert, wo es an vielfältigen physiologischen Prozessen beteiligt ist.
• In thermogenen Fettzellen vermittelt mitochondriales ALPL die Hydrolyse von N-Phosphokreatin und treibt damit einen nutzlosen Kreatinzyklus an, der Energie als Wärme für die adaptive Thermogenese abgibt (nach Ähnlichkeit).
• Es kann mikrobielle Produkte wie Lipopolysaccharide (LPS) und Poly I:C dephosphorylieren, was auf eine Rolle bei der Modulation angeborener Immunantworten hindeutet. Zugehörige Referenzen: PMID:28448526

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus der N-terminalen Region (aa1-100); diese Region kann im reifen Enzym verborgen oder gespalten sein. Bestätigen Sie die Erkennung des nativen Proteins in Ihrem experimentellen System.
• Für Western Blot (WB) kann je nach Probenvorbereitung eine Bande bei ~57 kDa (Vorläufer) oder ~80 kDa (reif, glykosyliert) beobachtet werden; empfehlen sich die Verwendung von frischen Lysaten und Proteaseinhibitoren.
• Bei der Immunhistochemie (IHC-P) kann eine Antigen-Retrieval für formalinfixierte Paraffineinbettungen erforderlich sein; validieren Sie in ALPL-exprimierenden Geweben wie Knochen, Leber oder Niere.
• Für ELISA-Anwendungen wird im Sandwich-Format die Paarung mit einem Detektionsantikörper empfohlen, der ein anderes Epitop targetiert.
• Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ist bestätigt; dennoch sollte die Sequenzhomologie überprüft werden, wenn Sie in anderen Spezies verwendet wird.
• Vermeiden Sie mehrere Gefrier-Auftau-Zyklen; aliquotieren Sie und lagern Sie bei -20°C oder -80°C je nach Bedarf.

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