Anti-ALIX Kaninchen-monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IP, ELISA - Q8WUM4

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ALIX

• ALIX (programmed cell death 6-interacting protein), auch bekannt als AIP1, HP95, DRIP4 und MCPH29, wird vom PDCD6IP-Gen kodiert und existiert aufgrund von alternativem Spleißen in mehreren Isoformen.
• Es ist ein Klasse-E-VPS-Protein, das für die Biogenese multivesikulärer Körper (MVB) essenziell ist und konzentriert sowie sortiert Ladung für die Bildung intraluminaler Vesikel über den ESCRT-Signalweg. Verwandte Referenzen: PMID:14739459
• ALIX bindet an das Phospholipid Lysobisphosphatidsäure (LBPA) auf inneren MVB-Membranen und dient als Adapter für eine Untergruppe von ESCRT-III-Proteinen wie CHMP4B.
• Das Protein wird für die Zytokinese benötigt und wirkt in der Abscissionsschritt über topologisch äquivalente Membranspaltungsereignisse. Verwandte Referenzen: PMID:17556548 PMID:17853893 PMID:18641129
• Gemeinsam mit SDC1/4 und SDCBP reguliert ALIX die Exosomen-Biogenese und beeinflusst die interzelluläre Kommunikation. Verwandte Referenzen: PMID:22660413
• Subzellulär lokalisiert sich ALIX im Zytosol, in Melanosomen, Zentrosomen, Tight Junctions und dem Midbody-Ring und wird in extrazellulären Exosomen sezerniert.
• Es beteiligt sich an Wirt-Virus-Interaktionen, erleichtert die Knospung von HIV-1 durch Interaktion mit CHMP4B und kann eine Rolle bei der Apoptose und der Aufrechterhaltung der Epithelbarriere spielen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung, Phosphorylierung und Methylierung, die seine multifunktionalen Aktivitäten beeinflussen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das für diesen Antikörper verwendete Immunogen ist rekombinantes Protein; beachten Sie, dass der Antikörper je nach Anwendung sowohl natives als auch denaturiertes ALIX erkennen kann.
• Für Western Blot (WB) validieren Sie in Ihrem spezifischen Probenystem und optimieren Sie die Proteinbeladung, um die 96-kDa-Bande zu detektieren; beachten Sie, dass posttranslationale Modifikationen leichte Mobilitätsverschiebungen verursachen können.
• In IF/ICC-Experimenten können Fixierungs- und Permeabilisierungsmethoden die Färbung verschiedener ALIX-Pools (zytosolisch, zentrosomal, Midbody) beeinflussen; erwägen Sie das Testen mehrerer Protokolle.
• Für IP bestätigen Sie die Kompatibilität des Antikörpers mit Ihrem Lysepuffer und sichern Sie die Target-Anreicherung durch Durchführung paralleler Kontrollen.
• Bei der Verwendung von ELISA schließen Sie geeignete positive (rekombinantes Protein) und negative Kontrollen ein, um Empfindlichkeit und Spezifität zu beurteilen.

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