Anti-AKT1S1/PRAS40 Kaninchen pAb für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - Q96B36

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von AKT1S1/PRAS40

• AKT1S1/PRAS40 (Prolinreiches AKT1-Substrat 1) ist auch als 40 kDa prolinreiches AKT-Substrat (PRAS40) bekannt und wird vom Gen AKT1S1 codiert, das ein Protein von ~27 kDa produziert (UniProt: Q96B36); Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Transkriptvarianten.
• Es fungiert als negativer Regulator von mTORC1 und hemmt die Kinaseaktivität durch Besetzung der MTOR-Substratrekrutierungsstelle (PubMed:17277771, PubMed:17386266, PubMed:17510057, PubMed:29236692).
  Verwandte Referenzen: PMID:17277771, PMID:17386266, PMID:17510057, PMID:29236692
• Nach Stimulation durch Insulin oder Nährstoffe wird AKT1S1 hyperphosphoryliert und dissoziiert von mTORC1, wodurch die Hemmung aufgehoben wird und die mTORC1-Signalgebung fortschreiten kann (PubMed:17386266, PubMed:18372248).
  Verwandte Referenzen: PMID:17386266, PMID:18372248
• Die inhibitorische Funktion von AKT1S1 wird selbst durch Phosphorylierung und anschließende Bindung an 14-3-3-Proteine reguliert, was seine Dissoziation vom Komplex fördert (PubMed:16174443, PubMed:18372248).
  Verwandte Referenzen: PMID:16174443, PMID:18372248
• Das Protein ist überwiegend im Zytoplasma/Zytosol lokalisiert, was mit seiner Rolle bei der Modulation der mTORC1-Aktivität an lysosomalen und zytosolischen Standorten übereinstimmt.
• AKT1S1 ist in allen Geweben weit verbreitet exprimiert, mit den höchsten Konzentrationen in Leber und Herz; Die Expression ist in Krebszelllinien (z. B. A-549, HeLa) im Vergleich zu normalen Linien oft erhöht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung an mehreren Serin/Threonin-Resten und Methylierung; Diese Ereignisse beeinflussen seine Aktivität und Interaktionen.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen (synthetisches Peptid, Aminosäuren 150-256) zielt auf eine zentrale Region des menschlichen AKT1S1 ab; Stellen Sie sicher, dass Ihre Probe das vollständige Protein oder Isoformen mit diesem Epitop exprimiert, um falsch negative Ergebnisse zu vermeiden.
• Bei der Western Blotting wandert AKT1S1 bei etwa 27 kDa; Verwenden Sie idealerweise eine Positivkontrolle wie HeLa- oder A-549-Lysat und validieren Sie die Bandenspezifität bei Bedarf mit blockierenden Peptiden oder siRNA.
• Beachten Sie bei IHC-P und IF/ICC die zytoplasmatische Lokalisation von AKT1S1; Für eine optimale Detektion können Permeabilisierung und Antigenretrieval erforderlich sein.
• Dieser Antikörper ist für ELISA geeignet; Führen Sie Checkerboard-Titrationen durch, um die optimalen Beschichtungs- und Detektionsbedingungen für Ihr spezifisches Assay-Setup zu ermitteln.

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