Anti-AKT1-Polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P31749

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AKT1-Funktion und -Lokalisierung

• AKT1 (PKB/PKB alpha/RAC-PK-alpha) ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase und eine von drei eng verwandten AKT-Isoformen (AKT1, AKT2, AKT3), die fundamentale zelluläre Prozesse wie Stoffwechsel, Proliferation, Überleben, Wachstum und Angiogenese regulieren. Verwandte Referenzen: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• AKT1 phosphoryliert eine breite Palette von Substraten, um die Insulinsignalgebung, den Glukosestoffwechsel und das Zellwachstum zu steuern. Es phosphoryliert TSC2, aktiviert mTORC1, um die Proteinsynthese und das Zellwachstum zu fördern, und phosphoryliert FOXO-Transkriptionsfaktoren, was zu ihrer zytoplasmatischen Sequestrierung und Hemmung der Expression pro-apoptotischer Gene führt. Verwandte Referenzen: PMID:12150915, PMID:12172553, PMID:10358075, PMID:21432781
• AKT1 ist entscheidend für das Zellüberleben: Es phosphoryliert MAP3K5/ASK1 an Ser-83, um den durch oxidativen Stress induzierten Apoptose zu hemmen, und phosphoryliert BAD, um dessen pro-apoptotische Funktion zu blockieren. Es aktiviert auch CREB1 und verbessert so die Transkription anti-apoptotischer Gene wie BCL2 und MCL1. Verwandte Referenzen: PMID:11154276, PMID:10926925, PMID:9829964
• AKT1 spielt eine Schlüsselrolle bei der insulinvermittelten Glukoseaufnahme, indem es die Translokation des SLC2A4/GLUT4-Transporters zur Plasmamembran fördert und GSK3 hemmt, wodurch die Glykogensynthese stimuliert wird.
• AKT1 lokalisiert im Zytoplasma, Kern, Zellmembran und im mitochondrialen Intermembranraum, wodurch es die Modulation der Signalgebung an mehreren subzellulären Orten ermöglicht.
• AKT1 ist ubiquitär in menschlichen Geweben exprimiert; die AKT1-Proteinwerte steigen von normalen zu malignen Zuständen bei Prostatakrebs an, und seine phosphorylierte Tyr-176-Form ist während der Progression von Brustkrebs erhöht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid aus den Aminosäuren 100-200, eine zentrale Region, die eine gute Zugänglichkeit bieten kann. Erwägen Sie die Verwendung dieses Antikörpers zum Nachweis des Gesamt-AKT1-Proteins in verschiedenen Lysaten.
• Für Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 56 kDa. Eine Bande dieser Größe wird in menschlichen, murinen und rattigen Proben erwartet, basierend auf der berichteten Kreuzreaktivität. Überprüfen Sie den Molekulargewichtsmarker und verwenden Sie geeignete Ladungskontrollen.
• Dieser polyklonale Antikörper ist geeignet für Immunhistochemie (IHC-P) und Immunfluoreszenz (IF/ICC). Optimieren Sie die Antigen-Retrieval-Methoden für Paraffin-eingebettete Gewebe und fügen Sie geeignete Negativkontrollen hinzu, um die Spezifität zu beurteilen.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper als Capture- oder Detektionsreagenz verwendet werden. Validieren Sie die optimale Arbeitskonzentration empirisch unter Verwendung des Immunogen-Peptids als Positivkontrolle.
• Da die AKT1-Aktivierung vom Phosphorylierungsstatus abhängt (z. B. Thr-308, Ser-473), erwägen Sie die Kombination mit aktivierungsspezifischen Antikörpern für Signalstudien.
• Wegen der Sequenzähnlichkeit zwischen AKT-Isoformen überprüfen Sie bitte die Isoformspezifität in Ihrem experimentellen System.

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