Anti-AKT1 polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, IHC-P, ELISA - P31749

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von AKT1

• AKT1 ist eine Serin/Threonin-Proteinkinase, auch bekannt als Proteinkinase B (PKB), die zur Familie der AKT-Kinasen gehört (AKT1, AKT2, AKT3). Sie reguliert vielfältige Prozesse wie Stoffwechsel, Proliferation, Zellüberleben, Wachstum und Angiogenese. Verwandte Referenzen: PMID:11882383 PMID:15526160 PMID:15861136
• AKT1 vermittelt die Wirkung von Wachstumsfaktoren wie Insulin, IGF-1 und EGF stromabwärts von PI3K und steuert die Glukoseaufnahme über GLUT4-Translokation sowie die Glykogensynthese durch Hemmung von GSK3. Verwandte Referenzen: PMID:11994271
• Es fördert das Zellüberleben durch Phosphorylierung und Hemmung pro-apoptotischer Faktoren wie BAD und MAP3K5 sowie durch Aktivierung von Überlebenswegen wie NF-κB und CREB1. Verwandte Referenzen: PMID:11154276 PMID:9829964
• AKT1 befindet sich im Zytoplasma, Zellkern, an der Zellmembran und im intermembranräumlichen Raum von Mitochondrien, was seine Beteiligung an Signalprozessen in mehreren zellulären Kompartimenten widerspiegelt.
• AKT1 unterliegt wichtigen posttranslationalen Modifikationen wie Phosphorylierung und Acetylierung und gilt als Protoonkogen. Seine Expression ist in Krebserkrankungen oft hochreguliert, wobei die phosphorylierte Form an Tyr-176 im Verlauf der Brustkrebsprogression ansteigt.
• AKT1 wird ubiquitär in menschlichen Zellen exprimiert und spielt eine entscheidende Rolle bei Zellwachstum und Zelldifferenzierung. Gewebsspezifische Hochregulation wird bei Prostata- und Brustkrebs beobachtet.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem Peptid im C-terminalen Bereich (AS 350–480) von humanem AKT1, was Isoformspezifität verleihen kann; bei Bedenken bezüglich Kreuzreaktivität mit AKT2 oder AKT3 sollte jedoch eine Validierung mit rekombinanten Proteinen oder siRNA durchgeführt werden.
• Für Western Blotting ergibt sich unter denaturierenden und reduzierenden Bedingungen typischerweise eine Bande bei ~56 kDa. Verwenden Sie geeignete Positivkontrollen (z. B. HeLa-, MCF-7-Lysate) und beachten Sie, dass die beobachtete Mobilität vom Phosphorylierungsstatus abhängen kann.
• Für IF/ICC- und IHC-P-Protokolle sind gegebenenfalls Permeabilisierung bzw. Antigenretrieval erforderlich. Optimieren Sie die Fixierungsmethoden (z. B. 4 % PFA vs. Methanol) für Ihren Probentyp und fügen Sie Blockierungsschritte hinzu, um den Hintergrund zu minimieren.
• ELISA-Anwendungen können im indirekten oder Sandwich-Format aufgebaut werden; die Kombination mit einem geeigneten Fangantikörper kann die Empfindlichkeit erhöhen. Titrieren Sie den Antikörper und verwenden Sie einen konstanten Beschichtungspuffer.
• Kreuzreaktivität mit AKT1 aus Maus und Ratte ist nachgewiesen, aber bei Verwendung nicht-menschlicher Proben sollte die artspezifische Sequenzhomologie im Immunogenbereich überprüft werden.

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