Anti-AKT1 (phospho T308) Kaninchen-mAk für WB, ELISA - P31749

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AKT1-Funktion und -Lokalisierung

• AKT1 ist ein Mitglied der AKT-Serin/Threonin-Kinase-Familie, zu der auch AKT2 und AKT3 gehören, und reguliert kritische zelluläre Prozesse wie Stoffwechsel, Proliferation, Überleben, Wachstum und Angiogenese (PubMed:11882383, PubMed:15526160, PubMed:15861136). Verwandte Referenzen: PMID:11882383, PMID:15526160, PMID:15861136
• AKT1 fördert das Zellüberleben, indem es MAP3K5 bei Ser-83 phosphoryliert, was die MAP3K5-Kinaseaktivität als Reaktion auf oxidativen Stress hemmt und so Apoptose verhindert (PubMed:11154276). Verwandte Referenzen: PMID:11154276
• Bei der Insulinsignalgebung vermittelt AKT1 die Proteinsynthese und das Zellwachstum durch Phosphorylierung von TSC2 bei Ser-939 und Thr-1462, was zur Aktivierung des mTORC1-Signalwegs führt (PubMed:12150915, PubMed:12172553). Verwandte Referenzen: PMID:12150915, PMID:12172553
• AKT1 phosphoryliert FOXO-Transkriptionsfaktoren, einschließlich FOXO1 bei Thr-24, Ser-256 und Ser-319, induziert die Bindung von 14-3-3-Proteinen und die zytoplasmatische Retention und hemmt dadurch ihre pro-apoptotischen Funktionen (PubMed:10358075). Verwandte Referenzen: PMID:10358075
• Das Protein lokalisiert sich im Zytoplasma, Kern, Zellmembran und im mitochondrialen Intermembranraum, was seine vielseitigen regulatorischen Rollen widerspiegelt.
• AKT1 wird in allen menschlichen Zelltypen exprimiert, wobei eine erhöhte Expression bei Prostatakrebs und eine erhöhte Tyr-176-Phosphorylierung in fortschreitenden Brustkrebsstadien beobachtet wurde.
• Die Phosphorylierung bei Thr308 ist ein kritisches Ereignis für die AKT1-Kinaseaktivierung und dient als Schlüsselmarker für die PI3K-Signalwegaktivität in Forschungs- und Diagnostikanwendungen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Phosphopeptid, das den Resten um Thr308 von humanem AKT1 entspricht; validieren Sie die Spezifität durch Vergleich der Signale mit und ohne Phosphatasebehandlung.
• Für den Western Blot wird ein Hauptband bei ~56 kDa erwartet; verwenden Sie frische Protease- und Phosphataseinhibitoren während der Probenvorbereitung, um die Phosphorylierung zu erhalten.
• Erwägen Sie die Verwendung des Antikörpers im ELISA, um die AKT1-Thr308-Phosphorylierungsniveaus zu quantifizieren; die Kombination mit einem Gesamt-AKT1-Antikörper ermöglicht eine Normalisierung.
• Optimieren Sie die Antikörperverdünnung für jede Anwendung und Zelllinie, um das beste Signal-Rausch-Verhältnis zu erzielen.

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