Anti-AKAP8 Kaninchen-Polyklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - O43823

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AKAP8-Funktion und Lokalisierung

• AKAP8, auch bekannt als AKAP95, ist ein A-Kinase-Ankerprotein, das die cAMP-abhängige Proteinkinase (PKA Typ II) in bestimmte subzelluläre Kompartimente sortiert und so eine präzise Signalgebung ermöglicht (PubMed:9473338). Verwandte Referenzen: PMID:9473338
• Es dient als Gerüstprotein für PKA auf mitotischen Chromosomen, rekrutiert die Condensin-Komplex-Untereinheit NCAPD2 und erhält so die Chromosomenkondensation während der Mitose unabhängig von der PKA-Verankerung aufrecht (PubMed:10601332, PubMed:10791967, PubMed:11964380). Verwandte Referenzen: PMID:10601332, PMID:10791967, PMID:11964380
• AKAP8 ist an der Zellzyklusregulation beteiligt, indem es die Bereitstellung von Cyclin D/E für CDK4 erleichtert, und wird für den G2/M-Übergang und die mitotische Histon-Deacetylierung über die Rekrutierung von HDAC3 benötigt (PubMed:14641107, PubMed:16980585). Verwandte Referenzen: PMID:14641107, PMID:16980585
• Es moduliert die Toll-like-Rezeptor-Signalgebung und unterdrückt die TNF-Produktion in der frühen LPS-induzierten Makrophagenaktivierung durch PKA-Targeting an NFKB1 (By similarity).
• Das Protein lokalisiert in mehreren zellulären Kompartimenten, einschließlich Zellkern, Nukleolus, Kernmatrix und Zytoplasma, was kontextabhängige Funktionen wie Chromatin-Remodellierung, Transkriptionsregulation und Signaltransduktion ermöglicht.
• AKAP8 bindet bevorzugt GC-reiche DNA und assoziiert mit ribosomaler RNA (rRNA)-Chromatin, was auf eine Rolle bei der Regulation der rDNA-Transkription hindeutet (PubMed:26683827). Verwandte Referenzen: PMID:26683827
• Hoch exprimiert in Herz, Leber, Skelettmuskel, Niere, Bauchspeicheldrüse und reifen dendritischen Zellen, was seine breite physiologische Relevanz widerspiegelt.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 480–692 von humanem AKAP8, einer Region, die die C-terminalen Zinkfinger-Domänen umfasst; bedenken Sie, dass der Antikörper Epitope in dieser funktionell relevanten DNA-Bindungsregion erkennen kann.
• Für Western Blot (WB) ist ein spezifisches Band bei etwa 76 kDa zu erwarten; verwenden Sie kernangereicherte Lysate aus humanen oder murinen Zellen (z.B. HeLa, HEK293, NIH/3T3) als positive Kontrollen und validieren Sie mit Molekulargewichtsmarkern.
• Bei Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist eine punktförmige Kernfärbung mit möglicher nukleolärer und zytoplasmatischer Lokalisierung zu erwarten; eine Gegenfärbung mit Kernmarkern (z.B. DAPI, Lamin) wird zur Bestätigung empfohlen.
• Für ELISA können Standard-Direkt- oder Sandwich-Protokolle angewendet werden; optimieren Sie die Konzentration des Beschichtungsantigens und die Antikörperverdünnung unter Verwendung von rekombinantem AKAP8-Protein oder Peptid.
• Angesichts der Kreuzreaktivität mit Maus eignet sich dieser Antikörper für artenübergreifende Studien; bestätigen Sie stets die Spezifität über Knockdown- oder Knockout-Kontrollen, um zuverlässige Daten zu gewährleisten.

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