Anti-AK4 Kaninchen-Polyclonale Antikörper für WB, IP, ELISA - P27144

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von AK4

• AK4, auch bekannt als Adenylatkinase 3-ähnlich oder GTP:AMP-Phosphotransferase, ist ein mitochondriales Enzym, das vom AK4-Gen (GenID: 205) kodiert wird und zur Familie der Adenylatkinasen gehört.
• Es fungiert als mitochondriale Nukleosidphosphatkinase mit breiter Spezifität und erhält die zelluläre Nukleotidhomöostase durch Katalyse von Nukleosidphosphat-Umwandlungen. Verwandte Referenzen: PMID:19073142 PMID:19766732 PMID:23416111
• AK4 phosphoryliert bevorzugt AMP zu ADP unter Verwendung von ATP als Phosphatdonator; es kann auch GTP als alternativen Phosphatdonator für die AMP-Phosphorylierung nutzen. Verwandte Referenzen: PMID:19766732
• In vitro zeigt AK4 eine breitere Substratspezifität: es phosphoryliert CMP, dAMP und dCMP und verwendet GTP als alternativen Donor. Verwandte Referenzen: PMID:19766732 PMID:23416111
• Das Enzym besitzt außerdem Diphosphatkinase-Aktivität und bildet ATP, CTP, GTP, UTP, TTP, dATP, dCTP und dGTP aus den entsprechenden Diphosphaten. Verwandte Referenzen: PMID:23416111
• AK4 spielt eine entscheidende Rolle bei der Regulierung zellulärer ATP-Spiegel durch Modulation der Phosphorylierung und Aktivierung des Energiesensors AMPK. Verwandte Referenzen: PMID:24767988 PMID:26980435
• Es hat eine Schutzfunktion bei der zellulären Antwort auf oxidativen Stress und trägt zur mitochondrialen Resilienz bei. Verwandte Referenzen: PMID:19130895 PMID:23474458 PMID:26980435
• Subzellulär ist AK4 in der mitochondrialen Matrix lokalisiert, was mit seiner Rolle im mitochondrialen Nukleotidstoffwechsel übereinstimmt.
• Die Gewebeexpression ist am höchsten in der Niere, mäßig in Herz und Leber und gering im Gehirn – dies spiegelt die Bedeutung in Geweben mit hohem Energiebedarf wider.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den N-terminalen 223 Aminosäuren des humanen AK4 und deckt die konservierte Adenylatkinase-Domäne ab. Diese Region ist zwischen Mensch und Maus hochhomolog, was die beobachtete Kreuzreaktivität unterstützt.
• Verwenden Sie für die Western Blot (WB)-Analyse Gewebslysate aus Niere oder Leber als Positivkontrolle. Gehen Sie von einer Startverdünnung von 1:500–1:2000 aus und validieren Sie mit passenden Molekulargewichtsmarkern (~25 kDa).
• Für die Immunpräzipitation (IP) können mitochondriell angereicherte Fraktionen vorteilhaft sein, um die Zielmenge zu erhöhen. Optimieren Sie Antikörpermenge und Inkubationsbedingungen empirisch.
• Beschichten Sie für ELISA-Anwendungen die Platte mit rekombinantem AK4-Protein als Standard und titrieren Sie den Antikörper. Die Paarung mit einem Nachweisantikörper erfordert eine sorgfältige Validierung.
• Da AK4 ein Protein der mitochondrialen Matrix ist, sollten Sie eine subzelluläre Fraktionierung oder organsellspezifische Färbungen in Betracht ziehen, um die Signalspezifität zu erhöhen.

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