Anti-AK2-Polyklonaler Antikörper für WB und ELISA - P54819

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AK2-Funktion und -Lokalisierung

• Adenylatkinase 2 (AK2), auch bekannt als ATP-AMP-Transphosphorylase 2, ist ein mitochondriales Enzym, das die reversible Übertragung der terminalen Phosphatgruppe zwischen ATP und AMP katalysiert, wobei zwei ADP-Moleküle entstehen. Diese Reaktion ist zentral für die zelluläre Energiehomöostase und den Adeninnukleotidstoffwechsel.
• Die Adenylatkinase-Aktivität ist entscheidend für die Regulation der Phosphatnutzung und der AMP-De-novo-Biosynthesewege und hilft, das angemessene Gleichgewicht der Adeninnukleotide innerhalb der Zelle aufrechtzuerhalten.
• AK2 spielt eine Schlüsselrolle bei der Hämatopoese, dem Prozess der Blutzellbildung, was auf seine Bedeutung für die Funktion und Differenzierung hämatopoetischer Stammzellen hinweist.
• Das Protein lokalisiert sich im mitochondrialen Intermembranraum, wo es an der Aufrechterhaltung des mitochondrialen Adeninnukleotidpools und dem Energietransfer zwischen Mitochondrien und dem Zytosol beteiligt ist.
• AK2 ist ubiquitär exprimiert, mit hohen Spiegeln in Herz, Leber und Niere und niedrigeren Spiegeln in Gehirn, Skelettmuskel und Haut. Bemerkenswerterweise ist es in Thrombozyten vorhanden, aber in Erythrozyten abwesend, die keine Mitochondrien besitzen. In Leukozyten ist AK2 leicht nachweisbar, während die zytosolische Isoform AK1 meist fehlt, was auf eine Anfälligkeit von Leukozyten für AK2-Mangel hindeutet.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Acetylierung und Phosphorylierung, und das Protein enthält Disulfidbrücken und eine ATP-Bindungsstelle. Alternatives Spleißen erzeugt mehrere Isoformen. Mutationen im AK2-Gen sind mit retikulärer Dysgenese assoziiert, einer schweren Form der schweren kombinierten Immundefizienz (SCID).

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das verwendete Immunogen ist ein rekombinantes Fusionsprotein, das die Volllängensequenz (Aminosäuren 1-232) von humanem AK2 umfasst. Dieses Design ermöglicht es dem Antikörper möglicherweise, die native Struktur von AK2 in verschiedenen Assays zu erkennen. Für Western Blots sollten Sie Zelllysate aus menschlichen oder murinen Zelllinien, die bekanntermaßen AK2 exprimieren (wie HeLa oder HEK293), in Betracht ziehen und die Bande bei ~26 kDa verifizieren.
• Für ELISA-Anwendungen kann das rekombinante Immunogen als Positivkontrolle dienen. Eine Optimierung der Beschichtungsbedingungen und der Antikörperverdünnung kann erforderlich sein.
• Obwohl gezeigt wurde, dass der Antikörper mit menschlichem und murinem AK2 kreuzreagiert, sollte die Reaktivität mit anderen Spezies oder Isoformen im entsprechenden experimentellen System validiert werden.

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