Anti-AGL (GDE) Kaninchen-Monoklonaler Antikörper für WB, IF/ICC, ELISA - P35573

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: AGL-Funktion und -Lokalisation

• AGL, auch bekannt als Glykogen-Entzweigungsenzym (GDE), wird durch das AGL-Gen kodiert und gehört zur Glycosid-Hydrolase-Familie, die Glycosidase- und Glycosyltransferase-Aktivitäten kombiniert.
• Es fungiert als multifunktionales Enzym im Glykogenabbau und besitzt sowohl 4-alpha-Glucanotransferase- als auch Amylo-1,6-Glucosidase-Domänen, die sequentiell arbeiten.
• Das Enzym ist für den vollständigen Glykogenabbau essentiell, überträgt eine kurze Oligosaccharidkette und spaltet dann die verbleibende alpha-1,6-verknüpfte Glucose an Verzweigungspunkten.
• AGL ist im Zytoplasma lokalisiert, was seiner Rolle im cytosolischen Glykogenstoffwechsel und seiner Interaktion mit Glykogenpartikeln entspricht.
• Mehrere Isoformen entstehen durch alternatives Spleißen mit gewebespezifischer Expression: Isoform 1 überwiegt in Leber, Niere und lymphoblastoiden Zellen; die Isoformen 2, 3 und 4 kommen zusätzlich in Muskel und Herz vor; die Isoformen 5 und 6 sind sowohl in Leber als auch Muskel zu finden.
• Mutationen im AGL-Gen verursachen Glykogenspeicherkrankheit Typ III (Cori-Krankheit), was seine kritische Rolle in der Glykogenhomöostase unterstreicht.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Phosphorylierung und Ubiquitinierung, wie durch Proteomikstudien belegt, die möglicherweise die Enzymaktivität oder -stabilität regulieren.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das auf die Aminosäuren 1-100 des humanen AGL (P35573) abgebildet wird. Diese N-terminale Region kann eine hohe Konservierung über Human, Maus und Ratte aufweisen, was mit der berichteten Kreuzreaktivität übereinstimmt.
• Für den Western Blot (WB) beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht etwa 175 kDa; alternatives Spleißen kann jedoch zusätzliche Banden erzeugen, die gewebespezifischen Isoformen entsprechen.
• Bei der Durchführung von Immunfluoreszenz (IF/ICC) ist eine cytoplasmatische Färbung zu erwarten, und geeignete Permeabilisierungs- und Fixierungsmethoden sollten optimiert werden.
• Für ELISA-Anwendungen kann der Antikörper für direkte oder Capture/Detection-Aufbauten verwendet werden; Serienverdünnungsexperimente werden empfohlen, um optimale Arbeitskonzentrationen zu bestimmen.
• Es sollte in Betracht gezogen werden, die Leistung des Antikörpers in Ihrem spezifischen Proben-System zu validieren, da die Expressionsniveaus und die Isoform-Prävalenz zwischen Zelltypen und Geweben variieren können.

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