Anti-Aggrecan Kaninchen-Polyklonale Antikörper für WB, IHC, IF, ELISA - P16112

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von Aggrecan

• Aggrecan-Kernprotein (AGC1, CSPG1, ACAN) ist ein großes Chondroitinsulfat-Proteoglykan und ein wichtiger Strukturbestandteil der extrazellulären Matrix des Knorpels.
• Es vermittelt die Widerstandsfähigkeit gegenüber Druckkräften im Gelenkknorpel und erhält die Gewebehydratation sowie tragfähigen Eigenschaften aufrecht.
• Aggrecan bindet Hyaluronsäure über seine N-terminale Globulardomäne sehr stark und bildet große supramolekulare Aggregate, die für die Integrität des Knorpels entscheidend sind.
• Aggrecan wird überwiegend im Knorpel exprimiert (PubMed:7524681) und auf Proteinebene auch in Fibroblasten nachgewiesen (PubMed:36213313). Verwandte Referenzen: PMID:7524681 PMID:36213313
• Das Protein wird sekretiert und befindet sich hauptsächlich in der extrazellulären Matrix von knorpeligen Geweben.
• Aggrecan gehört zur Familie der Aggrecan/Versican-Proteoglykane und enthält Immunoglobulin-ähnliche Domänen, Link-Domänen und eine C-Typ-Lektin-Domäne.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen, und das Kernprotein ist stark mit Chondroitinsulfat- und Keratansulfat-Seitenketten glykosyliert.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Disulfidbindungen, Calciumbindung und O-verknüpfte Glykosylierung; das reife Protein verfügt über eine EGF-ähnliche Domäne und Sushi-Wiederholungsmotive.
• Menschliche ACAN-Mutationen sind mit Skelettdysplasien und Zwergwuchsphänotypen verbunden, was seine essenzielle Rolle bei der Knorpelentwicklung und -funktion unterstreicht.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 420–575 des menschlichen Aggrecan, einer Region zwischen den Domänen G1 und G2; beachten Sie, dass diese interglobuläre Domäne in Gewebslysaten anfällig für Proteolyse sein kann.
• Für die Western Blotting kann die große Größe von Aggrecan (~261 kDa) und die umfangreiche Glykosylierung eine gradienten SDS-PAGE (z. B. 4–20 %) und verlängerte Transferzeiten erfordern; erwägen Sie eine Deglykosylierung zur Verbesserung der Bandenauflösung.
• Bei der Immunhistochemie (paraffiniert) kann Antigen-Retrieval mit Chondroitinase ABC oder Hyaluronidase Epitope demaskieren, indem sperrige GAG-Seitenketten entfernt werden.
• Für den ELISA kann die Beschichtung mit rekombinantem Aggrecan oder chondroitinase-behandelten Knorpelextrakten die Empfindlichkeit verbessern; die polyklonale Natur des Antikörpers kann ein robustes Signal in Sandwich-Assays liefern.

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