Anti-Adenylat-Kinase 4 monoklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF/ICC, ELISA - P27144

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Adenylat-Kinase 4

• Adenylat-Kinase 4 (AK4) ist eine mitochondrial lokalisierte Nukleosidphosphat-Kinase mit breiter Spezifität, die die zelluläre Nukleotid-Homöostase durch Katalyse von Nukleosid-Phosphat-Umwandlungen aufrechterhält. Verwandte Referenzen: PMID:19073142 PMID:19766732 PMID:23416111
• AK4 phosphoryliert bevorzugt AMP zu ADP unter Verwendung von ATP als Phosphatdonor; bei Verwendung von GTP phosphoryliert es ausschließlich AMP. Verwandte Referenzen: PMID:19766732
• In vitro kann AK4 auch CMP, dAMP und dCMP phosphorylieren und GTP als alternativen Phosphatdonor nutzen. Verwandte Referenzen: PMID:19766732 PMID:23416111
• AK4 zeigt Diphosphat-Kinase-Aktivität und erzeugt verschiedene Nukleosidtriphosphate (ATP, CTP, GTP, UTP, TTP, dATP, dCTP, dGTP) aus ihren Diphosphat-Substraten. Verwandte Referenzen: PMID:23416111
• AK4 ist in der mitochondrialen Matrix lokalisiert.
• AK4 zeigt hohe Expression in der Niere, moderate in Herz und Leber und niedrige im Gehirn.
• AK4 schützt Zellen vor oxidativem Stress und moduliert die zelluläre Energieerfassung durch Kontrolle der AMPK-Phosphorylierung. Verwandte Referenzen: PMID:19130895 PMID:23474458 PMID:24767988 PMID:26980435

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das die Aminosäuren 1–100 der humanen AK4 abdeckt, eine N-terminale Region, die im nativen Protein wahrscheinlich exponiert ist; dieses Design unterstützt Anwendungen wie IF/ICC, bei denen die native Konformation entscheidend sein kann.
• Für Western Blot (WB) reduzierende Bedingungen verwenden, um das Protein bei ~25 kDa aufzulösen. Die Spezifität sollte sowohl in humanen als auch in Rattenlysaten validiert werden, da Kreuzreaktivität mit Ratte berichtet wird.
• Für IHC-P und IF/ICC wird eine Optimierung der Antikörperverdünnung, der Antigen-Demaskierung und der Blockierungsbedingungen empfohlen, da die Leistung je nach Probentyp und Fixierung variieren kann.
• Bei ELISA sollten das Beschichtungsantigen und die Detektionsantikörper titriert werden, um ein optimales Signal-Rausch-Verhältnis zu erreichen; die Reaktivität des Antikörpers mit einem linearen Peptid-Immunogen deutet auf Eignung für sowohl direkte als auch Sandwich-ELISA-Formate hin.

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