Anti-ADAMTS5-Polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9UNA0

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ADAMTS5-Funktion und -Lokalisierung

• ADAMTS5, auch bekannt als Aggrecanase-2, ADAM-TS 11 oder ADMP-2, ist eine sezernierte Metalloprotease, die zur Familie der ADAMTS-Extrazellulären Proteasen gehört.
• ADAMTS5 fungiert als abbauendes Enzym der extrazellulären Matrix (ECM), das proteolytische Aktivität gegenüber Hyalectan-Chondroitinsulfat-Proteoglykanen (CSPGs) einschließlich ACAN, VCAN, BCAN und NCAN zeigt und eine Schlüsselrolle im Knorpelumsatz und bei der Remodellierung von Bindegewebe spielt. Verwandte Referenzen: PMID:16133547 PMID:18992360
• Das Protein lokalisiert sich im extrazellulären Raum und in der extrazellulären Matrix, wo es während der Entwicklung und der Gewebepflege die perizelluläre Umgebung remodelliert.
• ADAMTS5 enthält Metalloprotease-, Disintegrin- und Thrombospondin-Typ-1-Wiederholungsdomänen; die katalytische Aktivität erfordert Zinkbindung, und das Enzym wird zunächst als Zymogen produziert.
• Die Gewebeexpression wird auf niedrigem Niveau in Plazenta, Herz, Gehirn, Zervix, Uterus, Blase, Speiseröhre und Knorpel nachgewiesen, mit einer erhöhten Häufigkeit in arthritischen Gelenkkapseln.
• Durch die Spaltung von Versican trägt ADAMTS5 zur embryonalen Gliedmaßen- und Herzmorphogenese bei und erleichtert die Myoblastenfusion während der Skelettmuskelentwicklung und -regeneration.
• ADAMTS5 beteiligt sich auch an der Migration von T-Lymphozyten aus drainierenden Lymphknoten nach einer Virusinfektion.
• Das Protein unterliegt einer Spaltung an Paaren basischer Reste und enthält mehrere Disulfidbrücken und Glykosylierungsstellen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht einem synthetischen Peptid innerhalb der Aminosäuren 601–700 von humanem ADAMTS5 (NP_008969.2). Bei der Gestaltung von Nachweisstrategien überprüfen Sie, ob die Zielsequenz in Ihrer Spezies von Interesse konserviert ist, da eine Kreuzreaktivität für Mensch, Maus und Ratte berichtet wird.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ca. 101 kDa. Optimieren Sie den Gelanteil (z. B. 8–10 % Polyacrylamid) und die Transferbedingungen, um ein effizientes Blotting dieses relativ großen Proteins zu gewährleisten. Fügen Sie ein Positivkontrolllysat aus Plazenta- oder Knorpelgewebe ein.
• Da es sich um einen polyklonalen Antikörper handelt, kann er mehrere Epitope erkennen; Bestätigen Sie die Spezifität durch parallelen Nachweis mit einer unabhängigen Methode (z. B. siRNA-Knockdown oder Antigenkompetition), falls erforderlich.
• Für ELISA verwenden Sie einen geeigneten Detektionsantikörper und erwägen Sie die Verwendung von rekombinantem ADAMTS5 oder Gewebeextrakten als Fangantigen. Titrieren Sie den Antikörper, um eine optimale Arbeitskonzentration zu bestimmen.
• Obwohl der Antikörper vom Hersteller für WB und ELISA validiert wurde, sollte die Leistung in anderen Anwendungen (z. B. IHC, IF) empirisch unter den relevanten Proben- und Pufferbedingungen getestet werden.

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