Anti-ADAM28 Kaninchen-polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9UKQ2

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ADAM28

• ADAM28 (Disintegrin- und Metalloproteinase-Domäne enthaltendes Protein 28) ist ein Mitglied der ADAM-Familie, auch bekannt als eMDC II (epididymales metalloproteinase-ähnliches, disintegrin-ähnliches und cysteinreiches Protein II) oder MDC-L. Es wird vom ADAM28-Gen kodiert (Aliase ADAM23, MDCL) und unterliegt alternatives Spleißen.
• Es fungiert als Metalloprotease, die an adhäsiven und proteolytischen Vorgängen bei der Lymphozytenemigration beteiligt ist. Es kann das Ektodomänen-Abshedding von Lymphozyten-Oberflächenproteinen wie FASL und CD40L vermitteln und dadurch Immunantworten modulieren.
• Basierend auf seiner Expression und funktionellen Kontext kann ADAM28 auch eine Rolle bei der Spermienreifung spielen.
• Die subzelluläre Lokalisation umfasst die Zellmembran und Sekretion, was mit seinen transmembranen und sekretierten Domänen übereinstimmt. Das Protein enthält ein Signalpeptid, Propeptid, Metalloprotease-, Disintegrin-, cysteinreiche, EGF-ähnliche und transmembran Domänen.
• Wichtige posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Disulfidbindungsbildung und Spaltung an einem Paar basischer Reste, um das Zymogen in eine aktive Protease umzuwandeln. Es bindet Zink als Kofaktor für die Metalloprotease.
• ADAM28 wird überwiegend in sekundären lymphoiden Geweben exprimiert – Lymphknoten, Milz, Dünndarm, Magen, Dickdarm, Appendix und Trachea – wobei die Lymphozytenpopulation die primäre Quelle darstellt. Isoform 2 zeigt eine bevorzugte Expression in der Milz.

Experimentelle Anleitung und Technische Hinweise

• Das Immunogen umfasst die Aminosäuren 199-440 von humanem ADAM28, die im extrazellulären Bereich liegen, der Protease-, Disintegrin- und cysteinreiche Domänen enthält. Dieses Design kann sowohl die membrangebundene als auch die sezernierte Form des Proteins erkennen.
• Für Western Blot empfehlen sich Lysate von humanen lymphoiden Geweben (z. B. Lymphknoten, Milz) oder kultivierten Lymphozyten, da dies bekannte Expressionsorte sind. Maus-Kreuzreaktivität sollte mit geeigneten Gewebe- oder Zelllinien-Kontrollen validiert werden.
• Bei der SDS-PAGE-Probenaufbereitung können reduzierende Bedingungen erforderlich sein, um durch Disulfide verbundene Strukturen aufzutrennen; das vorausgesagte molekulare Gewicht des Volllängproteins beträgt ~87 kDa, obwohl aufgrund der Zymogenverarbeitung Fragmente beobachtet werden können.
• Bei ELISA-Anwendungen kann die Detektion von löslichem ADAM28 in biologischen Flüssigkeiten oder Zellüberständen evaluiert werden, da das Protein sezerniert werden kann. Fügen Sie rekombinantes Protein oder bekannte Positivkontrollen zur Assay-Optimierung hinzu.

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