Anti-ADAM10 Polyclonale Antikörper für WB, IF/ICC, FC, ELISA – O14672

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ADAM10

• ADAM10, auch bekannt als Kuzbanian oder CDw156, ist ein Mitglied der ADAM-Familie (A Disintegrin And Metalloprotease) und fungiert als transmembranäre Metalloprotease, die an der Ektodomänen-Ablösung (Ectodomain Shedding) verschiedener Substrate beteiligt ist.
• Es spaltet die membrangebundene Vorläuferform von Tumornekrosefaktor-alpha (TNF-alpha), um lösliches TNF freizusetzen – ein entscheidender Schritt in der Entzündungssignalisierung. Verwandte Referenzen: PMID:20592283
• ADAM10 wirkt als Alpha-Sekretase für das Amyloid-Vorläuferprotein (APP), reduziert die Produktion von Amyloid-beta und steht damit im Zusammenhang mit der Pathologie der Alzheimer-Krankheit. Verwandte Referenzen: PMID:11786905, PMID:26686862, PMID:29224781
• Es löst auch andere Adhäsionsmoleküle und Rezeptoren wie CD44, Cadherine, Ephrine und Notch-Liganden ab und reguliert dadurch Zelladhäsion, Migration und entwicklungsbiologische Signalwege.
• Subzellulär lokalisiert sich ADAM10 an der Plasmamembran, im Golgi-Apparat, in Clathrin-beschichteten Vesikeln und Zellverbindungen (Adhärens-Verbindungen) sowie in neuronalen Fortsätzen wie Axonen und Dendriten.
• Das Protein durchläuft eine komplexe posttranslationelle Verarbeitung, einschließlich Glykosylierung, Disulfidbrückenbildung und Spaltung seiner Prodomäne, um die aktive Protease zu erzeugen.
• ADAM10 wird breit exprimiert, mit hohen Gehalten im Gehirn, lymphoiden Geweben (Milz, Lymphknoten, Thymus), Knochenmark und Knorpel – was mit seinen Rollen bei der Neurogenese und Immunfunktion übereinstimmt. Verwandte Referenzen: PMID:23676497, PMID:11511685, PMID:9016778

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein rekombinantes Protein, das die Aminosäuren 214–672 von humanem ADAM10 umfasst und wichtige extrazelluläre Domänen abdeckt; der Antikörper kann sowohl die volle Länge als auch die gespaltene Form erkennen.
• Erwarten Sie im Western Blot eine Hauptbande nahe 84 kDa für das Volllängenprotein; zusätzliche Banden können durch Ablösung oder Aktivierung entstehen. Optimieren Sie Ladekontrollen und validieren Sie mit Ihren spezifischen Probenlysaten.
• Testen Sie für Immunfluoreszenz/ICC sowohl permeabilisierte als auch nicht permeabilisierte Bedingungen, um Oberflächen- versus intrazelluläre Färbemuster zu vergleichen.
• Titrieren Sie den Antikörper bei der Durchflusszytometrie sorgfältig und verwenden Sie Isotypkontrollen, um den Hintergrund zu berücksichtigen – insbesondere bei der Analyse von Zellen mit unterschiedlicher ADAM10-Expression.
• Berücksichtigen Sie bei der Durchführung eines ELISA die Paarung mit einem Fangantikörper, der gegen ein anderes Epitop spezifisch ist, oder die Verwendung von rekombinantem ADAM10 als Standard, um eine zuverlässige Quantifizierung zu gewährleisten.
• Da dieser Antikörper nachweislich mit Ratten-ADAM10 kreuzreagiert, überprüfen Sie die Reaktivität in Ihren aus Ratten gewonnenen Proben; für andere Spezies konsultieren Sie die Sequenzhomologie und führen Sie Vortests durch.

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