Anti-aktive Caspase-3 monoklonaler Antikörper für WB, ELISA - P42574

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: Caspase-3 Funktion und Lokalisierung

• Caspase-3 ist eine Thiol-Protease, die als Haupteffektor-Caspase in der Ausführungsphase der Apoptose wirkt und die Spaltung zahlreicher Proteine katalysiert. Verwandte Referenzen: PMID:18723680, PMID:20566630, PMID:23650375
• Bei Eintritt der Apoptose spaltet sie die Poly(ADP-ribose)-Polymerase PARP1 an einer spezifischen Aspartat-Glycin-Bindung. Verwandte Referenzen: PMID:10497198, PMID:16374543, PMID:7596430
• Caspase-3 aktiviert downstream Caspasen wie Caspase-6, -7 und -9 und verstärkt so das apoptotische Signal. Verwandte Referenzen: PMID:7596430
• Sie spaltet Huntingtin und ist an der Pathologie der Huntington-Krankheit beteiligt. Verwandte Referenzen: PMID:8696339
• Neben der Apoptose vermittelt Caspase-3 Pyroptose durch Spaltung von Gasdermin-E (GSDME). Verwandte Referenzen: PMID:35338844, PMID:35446120
• Caspase-3 ist hochexprimiert in Immunzellen und Geweben wie Lunge, Milz und Herz und überwiegend zytoplasmatisch lokalisiert.
• Das Protein liegt als Zymogen vor und wird durch proteolytische Spaltung aktiviert; es wird zudem durch Acetylierung, Phosphorylierung, S-Nitrosylierung und Ubiquitinierung reguliert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen ist ein synthetisches Peptid, das den Aminosäuren 1–100 von CASP3 (P42574) entspricht. Dieser Bereich umfasst die N-terminale Prodomäne; beachten Sie, dass der Antikörper sowohl die Pro- als auch die gespaltene Form erkennen kann, abhängig von der Epitopazugänglichkeit. Überprüfen Sie die Spezifität für aktive Caspase‑3 im entsprechenden biologischen System.
• Für Western Blot (WB) kann aktive Caspase‑3 als gespaltene Fragmente (z. B. p19, p17) und nicht als die全长 32 kDa Proform erscheinen. Verwenden Sie geeignete Apoptoseinduktoren und Positivkontrollen (z. B. Staurosporin-behandelte Zellen), um den Nachweis der aktiven Form zu bestätigen.
• Aufgrund der zytoplasmatischen Lokalisierung bereiten Sie zytosolische Extrakte für einen optimalen Nachweis im WB oder ELISA vor.
• Der Antikörper ist für WB und ELISA mit menschlichen Proben validiert. Für andere Anwendungen oder Spezies sollte die Kreuzreaktivität experimentell überprüft werden.

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