Anti-ACP5 polyklonaler Antikörper für WB, IF, IHC, ELISA - P13686

Kernproduktspezifikationen und -parameter

Biologischer Hintergrund: ACP5-Funktion und -Lokalisation

• ACP5 kodiert für die tartratresistente saure Phosphatase Typ 5 (TRAP, auch TrATPase genannt), ein Mitglied der Familie der sauren Phosphatasen, die für Dephosphorylierungsreaktionen verantwortlich sind.
• Das Enzym spielt eine Schlüsselrolle im Knochenstoffwechsel durch die Dephosphorylierung von Osteopontin und Knochen-Sialoprotein, was für die Osteoklastenfunktion und Knochenresorption entscheidend ist.
• ACP5 ist ein lysosomales Enzym; es wird mit einem Signalpeptid synthetisiert, das es zum Lysosom leitet, wo es seine katalytische Aktivität ausübt.
• Es benötigt Eisen als Kofaktor, was es zu einem Metallocnzym macht, und enthält Disulfidbrücken und Glykosylierungsstellen, die für seine Struktur und Stabilität wichtig sind.
• Erhöhte ACP5-Expression wird bei pathologischen Zuständen beobachtet, einschließlich Morbus Gaucher, Morbus Hodgkin und verschiedenen Leukämien (Haarzell-, B-Zell- und T-Zell-Leukämie), was auf sein Potenzial als Biomarker hindeutet.
• Das Protein wurde durch direkte Proteinsequenzierung und 3D-Strukturbestimmung charakterisiert, was seine Identität bestätigt und Einblicke in seine Funktion liefert.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 76-325 von humanem ACP5, was die katalytische Domäne einschließt; daher erkennt der Antikörper wahrscheinlich die reife Enzymform. Validieren Sie dies in Proben, die aktive Osteoklasten oder leukämische Zelllinien exprimieren.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht 37 kDa; Glykosylierung kann jedoch zu einer Verschiebung führen. Optimieren Sie die Probenvorbereitung und verwenden Sie geeignete Kontrollen.
• Für die Immunhistochemie (paraffineingebettet, IHC-P) kann eine Antigendemaskierung erforderlich sein; testen Sie mit enzymatischen und hitzeinduzierten Methoden.
• Bei der Immunfluoreszenz ist eine Permeabilisierung erforderlich, um die lysosomale Lokalisation nachzuweisen; eine Co-Färbung mit lysosomalen Markern kann die Spezifität bestätigen.
• Die Kreuzreaktivität mit Maus und Ratte ermöglicht translationale Studien; validieren Sie dies in Ihrem spezifischen Modellsystem.
• Die ELISA-Leistung sollte mit rekombinantem Protein oder biologischen Proben verifiziert werden; ziehen Sie die Paarung mit einem Detektionsantikörper in Betracht, wenn Sie einen Sandwich-Assay entwickeln.

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