Anti-ACLY polyklonaler Antikörper für WB, IHC-P, IF, ELISA - P53396

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ACLY

• ACLY kodiert für die ATP-Citrat-Synthase, auch bekannt als ATP-Citrat-(pro-S-)-Lyase (ACL) oder Citrat-Spaltungsenzym. Es ist ein Schlüsselenzym der Lipogenese, das die Spaltung von Citrat in Oxalacetat und Acetyl-CoA katalysiert und damit ein kritische Substrat für die de novo Lipidbiosynthese bereitstellt.
• Das Enzym dient als Brücke zwischen Kohlenhydratstoffwechsel und Fettsäuresynthese und bildet zytosolisches Acetyl-CoA, das für die Produktion von Cholesterin und Fettsäuren unerlässlich ist.
• ACLY ist überwiegend im Zytoplasma und Zytosol lokalisiert, wo es auf Citrat zugreifen kann, das aus den Mitochondrien exportiert wird.
• Posttranslationelle Modifikationen, einschließlich Acetylierung und Phosphorylierung, regulieren die ACLY-Aktivität als Reaktion auf ernährungsbedingte und hormonelle Signale.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Transkriptvarianten, die die enzymatische Funktion in unterschiedlichen Geweben potenziell feinabstimmen.
• ACLY gehört zur Familie der Acyl-CoA-Synthasen (AMP-bildend)/AMP-Säure-Ligasen und benötigt ATP und Magnesium als Cofaktoren für seine Transferaseaktivität.
• Aufgrund seiner zentralen Rolle bei der Lipidbiosynthese ist ACLY ein interessantes Ziel für Studien zu Stoffwechselstörungen, kardiovaskulärer Forschung und Krebsstoffwechsel.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen umfasst die C-terminale Region (Aminosäuren 752–1101) des menschlichen ACLY, was die Spezifität für das Zielprotein erhöhen kann.
• Für den Western Blot beträgt das vorhergesagte Molekulargewicht ~121 kDa; Verwenden Sie ein 6–8% SDS-PAGE-Gel und geeignete Transferbedingungen (z. B. Nasstransfer bei 100V für 60–90 Minuten), um dieses hochmolekulare Protein aufzutrennen.
• Bei IHC-P können Standardmethoden zur Antigen-Retrieval (z. B. Citratpuffer pH 6,0) vorteilhaft sein; Pilotversuche werden empfohlen, um das Signal-Rausch-Verhältnis zu optimieren.
• Für IF/ICC sollten Fixierungs- und Permeabilisierungsbedingungen empirisch ermittelt werden; Methanolfixierung oder eine Behandlung mit 0,1 % Triton X-100 sind gängige Ausgangspunkte für zytosolische Zielproteine.
• Um die Antikörperspezifität zu überprüfen, empfehlen sich die Verwendung von ACLY-Knockdown- oder Knockout-Zellmodellen oder der Vergleich mit bekannten positiven/negativen Gewebekontrollen.

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