Anti-Acetyl-CoA-Carboxylase-Monoklonaler Antikörper für WB, IP, ELISA - Q13085 / O00763

Kernprodukt-Spezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisierung der Acetyl-CoA-Carboxylase 1

• Acetyl-CoA-Carboxylase 1 (ACC1) ist ein zytosolisches, biotinabhängiges Enzym, das die ATP-abhängige Carboxylierung von Acetyl-CoA zu Malonyl-CoA katalysiert, den ersten und geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der de-novo-Fettsäurebiosynthese. Verwandte Referenzen: PMID:20457939, PMID:20952656, PMID:29899443
• Die Reaktion verläuft in zwei Schritten: ATP-abhängige Carboxylierung der Biotin-Prosthetischen Gruppe auf der Biotin-Carboxyl-Träger (BCC)-Domäne, gefolgt von der Übertragung der Carboxylgruppe auf Acetyl-CoA.
• ACC1 ist ein multifunktionales Enzym mit Biotin-Carboxylase (BC)-, Biotin-Carboxyl-Trägerprotein (BCCP)- und Carboxyltransferase (CT)-Domänen, die seine komplexe katalytische Aktivität ermöglichen.
• Die subzelluläre Lokalisierung ist primär zytoplasmatisch und zytosollich, was ihrer Rolle bei der zytosolischen Fettsäuresynthese entspricht.
• Gewebeexpression: ACC1 wird in Gehirn, Plazenta, Skelettmuskel, Nieren-, Pankreas- und Fettgewebe exprimiert; die Expression ist in Lungengewebe niedrig und in der Leiber nicht nachweisbar.
• Das Enzym wird streng durch Phosphorylierung (z. B. durch AMPK), allosterische Effektoren (Aktivierung durch Citrat, Hemmung durch Palmitoyl-CoA) und die Verwendung alternativer Promotoren reguliert, was seine zentrale Rolle bei der Stoffwechselkontrolle unterstreicht.
• ACC2 (codiert durch ACACB) ist eine mitochondriale Isoform, die Malonyl-CoA erzeugt, um Carnitin-Palmitoyltransferase I zu hemmen und die Fettsäureoxidation zu regulieren; der Antikörper kann aufgrund der Sequenzhomologie sowohl ACC1 als auch ACC2 erkennen.

Experimentelle Anleitung und technische Tipps

• Das Immunogen entspricht den Aminosäuren 500–600 des menschlichen ACC1 (NP_942133.1), einem Bereich, der wahrscheinlich mit ACC2 geteilt wird; validieren Sie die Isoformspezifität im entsprechenden Probenystem.
• Für WB: Aufgrund des hohen Molekulargewichts von ACC1 (265 kDa) und ACC2 (276 kDa) verwenden Sie SDS-PAGE-Gele mit niedrigem Prozentsatz (z. B. 6–8 %) und verlängerte Transferzeiten; fügen Sie vorgefärbte Hochmolekulargewichtsmarker hinzu.
• Überprüfen Sie die Leistung des Antikörpers in Ihrer Spezies und Anwendung; obwohl er für Mensch, Maus und Ratte validiert wurde, sollte die Kreuzreaktivität in anderen Spezies oder Assay-Formaten empirisch bestätigt werden.
• Für IP: Optimieren Sie die Antikörperkonzentration und verwenden Sie geeignete Beadsysteme (z. B. Protein A/G); berücksichtigen Sie den Einfluss von Biotinylierung oder endogenem Biotin auf die Detektion.
• In ELISA: Kombinieren Sie diesen Antikörper mit einem geeigneten ACC-Nachweisreagenz; testen Sie die Spezifität mit rekombinanten ACC1- oder ACC2-Proteinkontrollen.

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