Anti-ACAD8 polyklonaler Antikörper für WB, ELISA - Q9Z0M6

Kernproduktspezifikationen und Parameter

Biologischer Hintergrund: Funktion und Lokalisation von ACAD8

• Das Adhäsions-G-Protein-gekoppelte Rezeptor E5 (CD97) fungiert als Rezeptor, der sowohl an Adhäsions- als auch an Signalprozessen unmittelbar nach der Leukozytenaktivierung beteiligt ist.
• Es spielt eine wesentliche Rolle bei der Leukozytenmigration und vermittelt Zell-Zell-Interaktionen sowie den Immunzelltrafficking.
• Als Mitglied der Adhäsions-GPCR-Familie verfügt es über eine lange extrazelluläre Domäne mit mehreren EGF-ähnlichen Wiederholungen, die die Zelladhäsion erleichtern.
• Durch alternatives Spleißen entstehen mehrere Isoformen mit Unterschieden in der Anzahl der EGF-ähnlichen Domänen und der Untereinheitenzusammensetzung, die die Ligandenbindung und nachgeschaltete Signalwege potenziell modulieren.
• Das Protein lokalisiert hauptsächlich als Multipass-Membranprotein an der Zellmembran; allerdings kann eine sezernierte Form durch proteolytische Spaltung in den extrazellulären Raum freigesetzt werden.
• Die Expression findet sich überwiegend in Immunzellen, wobei hohe Gehalte in Lunge, Thymusdrüse, Milz und Knochenmark nachgewiesen werden, insbesondere auf myeloischen Zellen und Subpopulationen von T-, B- und NK-Zellen.
• Posttranslationale Modifikationen umfassen Glykosylierung, Phosphorylierung und die Bildung von Disulfidbindungen, die für die strukturelle Stabilität und die Rezeptorfunktion kritisch sind.
• Wichtige zugehörige Schlagworte: Alternatives Spleißen, Kalzium, Zelladhäsion, Zellmembran, Disulfidbindung, EGF-ähnliche Domäne, G-Protein-gekoppelter Rezeptor, Glykoprotein, Membran, Phosphoprotein, Rezeptor, Wiederholung, Sezerniert, Signal, Transducer, Transmembranhelix.

Experimentelle Anleitung und Technische Tipps

• Das Immunogen wurde gegen die Aminosäuren 24-415 von menschlichem ACAD8 entwickelt; berücksichtigen Sie eine Sequenzhomologie-Ausrichtung zwischen Mensch, Maus und Ratte, um die Kreuzreaktivität einzuschätzen.
• Für das Western Blotting bereiten Sie Gesamtzelllysate aus leukozytenreichen Geweben (z. B. Milz, Thymus) oder kultivierten Immunzellen zu und verwenden Sie ein geeignetes Reduktionsmittel, um die Disulfidbindungen in der extrazellulären Domäne zu berücksichtigen.
• Im ELISA verwenden Sie das rekombinante Immunogen als Positivkontrolle und optimieren die Beschichtungsbedingungen, um eine korrekte Antigenpräsentation sicherzustellen; führen Sie Kreuzreaktivitätstests mit Maus- und Rattenproteinen durch, um den Nachweis zu validieren.
• Angesichts des vorhergesagten Molekulargewichts des Zielproteins von 45 kDa (volle Länge ACAD8-Isoform) achten Sie auf mögliche Spaltprodukte oder Isoformen, insbesondere in sezernierten Fraktionen.
• Validieren Sie den Antikörper im relevanten biologischen Kontext, wie z. B. Leukozytenadhäsionsassays oder Migrationsstudien, um die Zuverlässigkeit der funktionellen Anwendung zu bestätigen.

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